(3)、卤化衍生化方法 引入卤原子→ECD检测器→也改善挥发性和稳定性。 卤素的作用是加成或取代 液相色谱的衍生化 1. 紫外衍生化反应 2. 荧光衍生化反应 3. 电化学衍生化反应 (1)紫外衍生化反应 苯甲酰氯 + 胺、醇、酚→苯甲酸酯类衍生物(200~360nm ) 苯甲酰化反应 (2)荧光衍生化反应 在目标化合物上接上能发出荧光的生色基团,如荧光素。 生物大分子的细胞破碎与蛋白质的去除 生物样品 植物:营养成分、农药残留等 动物:体内的药物及代谢产物、 糖类、维生素、氨基酸等 微生物: 待测物的位置 体液或细胞外:采用萃取方法。也可将干扰组分(如蛋白质、DNA、多糖等等)沉淀除去。 生物细胞内:首先将细胞破碎,再采用萃取或沉淀等方法。 细胞的破碎 目的:就是为了破坏细胞的外壳,使细胞内含物有效地释放出来,获得有效的提取。 1)细胞的破碎方法 ① 组织较柔软:匀浆器研磨 ② 组织较韧:铰碎→匀浆 ③ 纤维组织:捣碎器破碎或加砂研磨。 ④ 微生物坚韧的细胞壁:用自溶、冷热交 替、加砂研磨、超声波和加压处理。 1、细胞的破碎方法 2)机械法(机械切力) ① 高速组织捣碎机: 20000r/min。 对象:动植物组织 ② 匀浆器:铰碎组织。对生物大分 子破坏较少。 ③ 研磨 :玻璃砂。 3)物理法(物理作用) ① 反
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