离子注入介导甘草基因组DNA转化酵母菌.PDF

中草药 　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 3 期 2010 年 3 月 ·461 · 离子注入介导甘草基因组 D NA 转化酵母菌 ① 1 1 1 ,2 金 　湘 ,毛培宏 , 吕　杰 ( 1 新疆大学物理科学与技术学院 离子束生物技术中心 ,新疆 乌鲁木齐 　830008 ; 2 南京工业大学制药与生命科学学院 ,江苏 南京 　2 10009) ( + ) ( + ) 摘 　要 : 目的　以甘草酸为 目标产物 ,探讨氮离子 N 和氩离子 Ar 注入介导甘草基因组 DN A 在酵母菌中的 转化 。方法 　通过 N + 和 Ar + 注入介导乌拉尔甘草基因组 DN A 在异常汉逊酵母 H ansen ul a anom al a 中随机转化 , 转化后的酵母菌经斜面传代和液体培养后 ,用醋酐浓硫酸定性检识和 RPH PL C 方法 ,检测重组酵母菌培养液中 甘草酸和甘草次酸的量 。结果 　获得了生物合成甘草酸和/ 或甘草次酸的重组酵母菌 5 株 。液体培养 96 h , RP α β HPL C 测试其培养液中甘草酸最高量 11449 mg/ L ,18 甘草次酸和 18 甘草次酸最高量分别为 056 和 081 mg/ L 。 TL C 检测发现其中 1 株重组酵母菌的培养液中含一种未知的红色组分 。结论 　采用离子注入介导甘草基因级 DNA 大分子转化技术 ,可获得易于人工培养的产生甘草酸等次生代谢产物的微生物工程菌株 。 关键词 :离子注入 ;甘草基因组 DN A ;重组酵母菌 ;甘草酸 中图分类号 :R282 . 2 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 (20 10) 03046 104 Transf ormation of Gl ycy r r hiz a u r a lensis genomic D NA into yeast mediated by ion implantation J IN Xiang1 , MA O Peihon g1 , L U J ie1 ,2 ( 1 In stit ut e of Ion Beam Biot echnology , College of Physic Science and Technology , Xinj iang U niver sit y , U rumqi 830008 , China ; 2 College of L ife Science and Pharmacy , Nanj ing U niver sit y of Technology , Nanj ing 2 10009 , China) Abstract : Objective 　Wit h t he sole obj ect of glycyr r hizic acid p ro duct s , t he met ho d s were