TWIST表观遗传抑制雌激素受体α表达的分子机制与乳腺癌临床意义.pdfVIP

HEK293-TWIST 细胞系及其阴性对照的 HEK293 细胞系；应用该细 胞系，进行ChIP 测序分析，发现了一个位于人类ERα 基因（ESR1 ） 内含子7 上的与TWIST 结合的关键DNA 区域；再通过ChIP-re-ChIP 实验，揭示了HEK293-TWIST 细胞系中的ESR1 基因上的TWIST 结 合位点上与TWIST 结合的NuRD 复合物重要组分Mi-2 ， MTA2 和 HDAC2 均结合到人类ERα 基因（ESR1 ）内含子7 上的关键DNA 区 域。这说明了TWIST 可以有效地将NuRD 复合物募集到ESR1 基因 上的TWIST 结合区域；在高侵袭性的ERα 表达阴性的 SUM1315、 MDA-MB-435 和MDA-MB-231 细胞系中，用RT-PCR 和Western blot 检测出高水平的TWIST mRNA 和蛋白质表达，而在低侵袭性且高表 达ERα 的T47D 和MCF-7 细胞系中没有检测出TWIST 的mRNA 和 蛋白质水平。在荧光素报告基因分析实验中，我们将TWIST 结合的 关键 DNA 区域克隆到 pGL3-Pro-Luc