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实验七叶绿素ab含量及植物叶片光合强度的测定..ppt 41页

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* 实验七 叶绿素a、b含量的测定 及植物光合强度的测定 一、叶绿素a、b含量测定 实验原理 (含量占3/4) (含量占1/4) 叶绿体色素 叶绿素 类胡萝卜素 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素b 叶绿素a 分光光度法 根据叶绿素对某一特定波长的可见光具有吸收能力, 用Lambert- Beer定律计算出叶绿素的含量。 Lambert- Beer定律 A = K C 吸光度 吸收系数 浓度 叶绿素a的最大吸收峰:663nm 叶绿素b的最大吸收峰:645nm Lambert- Beer定律 A = K C A――吸光度 K――吸收系数 C――浓度 Ka663:82.04 Kb663:9.27 Ka645:16.75 Kb645:45.60 A663=82.04Ca+9.27Cb A645=16.75Ca+45.60Cb Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663 (mg / L) ? 器材与试剂 实验仪器:研钵、漏斗、分光光度计、三角烧瓶 实验试剂:丙酮、石英砂、碳酸钙 实验材料:青菜叶片 实验步骤 色素提取: 过滤 取叶1g 加少许石英砂、碳酸钙 丙酮5ml 研磨成匀浆 再用15ml丙酮转移至试管中,避光保存至残渣发白 3. 计算 2. 提取液1ml,用丙酮稀释至10ml 分光光度计下分别读取A663、A645 Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663 (mg / L) 以丙酮为对照, 叶绿素a、b含量: C×提取液体积(20ml)×稀释倍数(10) (mg / g) 样品的重量(1g) 二、 植物光合强度的测定 CO2+ H2O (CH2O)+ O2 光能 叶绿体 测定干物质的积累 测定O2的释放 测定CO2的吸收 半叶法 红外气体分析仪法 氧电极法 改良半叶法 破坏韧皮部的运输 选择测定样品 叶片基部处理 剪取样品 称重比较 结果计算 mg(干重)dm-2h-1 光合速率 = W光照-W未光照 S×t 红外线CO2分析仪法 CO2对红外线4.26微米处有较强的吸收能力,其吸收关系遵循Lambert- Beer定律。 CO2气体分析仪 (infrared CO2 gas analyzer简称IRGA) 进气 泵 参比室 叶室 排气 IARGA Ce Co 光合速率:f (Ce –Co)/S 20世纪50年代国外设计制造出红外线C02气体分析仪 20世纪70年代我国制造出了红外线C02气体分析仪 美国LI-COR生产的LI-6400便携式光合作用仪 英国ADC公司生产LCPRO+ 便携式光合作用仪 LC智能便携式光合作用仪系统 演示LCPRO+光合作用仪 实验操作 分光光度法测叶绿素a、b含量 实验基本技能(二) *

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