18分子标记辅助选择育种.pptVIP

（二）分子标记的原理和特点 植物基因组DNA上的 碱基替换、插入、缺失 或重复等，造成某种限 制性内切酶酶切位点的 增加或丧失，从而产生 限制性片断长度多态 性。 1、RFLP标记 （1）RFLP标记的原理 供体 受体 RR Rr rr (1-r)2 2r(1-r) r2 M R m r M R m r 亲本中DNA标记的带型 F1杂种中DNA标记的带型 在F2分离群体中分子标记类型 即MM,Mm,mm MM类型的分子标记所代表的目标基因型及其频率 M—抗性标记 R—抗性基因 m—感病标记 r—感病基因 基 本 步 骤 用DNA限制性内切酶消化 Southern杂交 放射性自显影或酶学检测 DNA提取 凝胶电泳分离，转移到滤膜上 A、无表型效应，不受环境条件和发育阶段的影响； B、共显性。 C、RFLP标记起源于基因组DNA的自身变异，在数量上几乎不受限制 D、DNA需要量大，检测技术繁杂，难以用于大规模的育种实践中。 在植物分子标记辅助育种中需要将RFLP转换成以PCR为基础的标记。 （2）特点 PCR-based markers PCR: polymerase chain reaction（聚合酶链式反应） Requires: - target DNA - thermostable