课件：抗体的人源化.pptVIP

* 抗体治疗药物 目前的客观现实是：研究进展迅速，但未达到常规治疗的应用阶段 障碍（原因）：抗体相对分子质量大，穿透力低，不能达到靶部位或摄取量低。鼠源性抗体的排斥反应 * 一、放射性同位素标记的抗体治疗药物 优：操作简便，用量少，能观察到药物在体内的分布和药物动力学。 缺：同位素来源困难，需放射线保护和污物处理。 * 二、抗癌药物偶联的抗体药物 常用的抗癌药物：氨甲喋呤（methotrexate, MTX）、阿霉素(adriamycin,ADM) 丝裂霉素(mitomycin, MMC)、环磷酰胺 (cyclophosphamide, CTX) 、新抑癌蛋白 (neocarzinostatin, NCS) 、正定霉素(doxorubicin, DOX)等。 * 抗体导向酶-前药疗法 选用单抗导向原理，与前药专一性活化酶交联并选择性地结合于肿瘤部位，使前药可区域特异性地在肿瘤组织内转化为活性细胞毒分子，有效增加肿瘤部位浓度降低正常组织中浓度。 * 三、毒素偶联的抗体药物 免疫毒素：毒素+抗体 ⒈免疫毒素及其换代制品 在导向药物中，毒素和抗体的交联物称为免疫毒素。 * 第一代免疫毒素是包含有A、B链完整毒素和抗体的交联物，其中B链非特异性结合，使其仅在体外应用。 第二代免疫毒素是利用抗体或抗体片段与毒素的A链或与A链相似的单链核糖体失活蛋白的结合物。因避免了第一代免疫毒素的非特异性，故能在体内有一定的抗肿瘤作用。 第三代免疫毒素重组免疫毒素用基因克隆方法改造毒素基因和小分子抗体基因重组表达。特异性好、稳定性强、渗透性佳、免疫源性低、可大量制备。 * ⒉免疫毒素的制备方法 ⑴毒素的来源 细菌毒素 植物毒素 ⑵载体的种类 ①小分子抗体FV或SCFV ②细胞生长因子 ③激素 ④CD4 * ⑶制备方法 先克隆毒素基因，再利用基因重组技术去除毒素中非特异性细胞结合部位基因。经改造的毒素基因，再与载体基因重组，转入受体菌中表达，形成融合蛋白，再经过纯化就得到重组免疫毒素。 * ⒊免疫毒素的临床应用 治疗肿瘤、自身免疫病并能克复组织移植排斥反应，可单独给药也可包裹在脂质体及其它微粒中给药。 请在此添加公司的署名信息 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 四、单链抗体（single chain antibody SCA 或single chain FV,SCFV） 单链抗体：具有有分子量小、穿透力强、免疫原性小特点，可与效应分子相连接构建新功能的抗体分子，是构建免疫毒素和双特异抗体的理想元件。 * 五、单域抗体和分子识别单位 （1）单域抗体:由VH(VL)单个可变区组成的，只有抗体分子的1/12，而且表面疏水性强，与抗原非特异结合能力也强。 （2）分子识别单位（MRU）:是由单个CDR区构成的小分子抗体，亲和力较低。 * 多功能抗体及其制备 一、双功能抗体 二、多功能抗体 三、抗体融合蛋白 * 一、双功能抗体 双功能抗体就是双特异性抗体（biospecific antibody，bisFvs） 一种非天然性的抗体，其结合抗原的两个臂具有不同的特异性。具有与两种抗原位点结合的能力。 VLA-linker-VHB * 应用： （1）治疗作用： 一条链针对抗原，一条针对免疫球蛋白，可与Ig结合，恢复抗体的全部功能。 （2）免疫诊断： 例：全血凝集试剂 免疫阻断抗体、细胞免疫组化抗体 * 二、多功能抗体 在单链抗体（ScFv）基础上发展了结合性能良好的多聚体：二聚体、三聚体和四聚体等。 优点： 克服了ScFv在体内清除过快的不足 高亲和性能，可同时与细胞膜上相邻的两个或多个靶抗原结合 * 三、抗体融合蛋白 抗体融合蛋白：从广义讲应属于双功能抗体范畴 （1）配基—配基型融合蛋白，如 CD4-Fcγ. （2）配基—Ig型嵌合抗体，如 IL-2-Ig （3）配基—FV型嵌合蛋白，如 CD4-FVCD3 (4) 受体—FV型融合蛋白 （5）酶—抗体型融合蛋白（abeneyme,抗体酶） * 其中较为成熟的是配基-Ig型嵌合蛋白 而酶-抗体型融合蛋白（即抗体酶，abeneyme）在药物治疗中应用前景广阔。它可在靶向位置上将前体药物转化成有效的药物，避免对正常组织的伤害，此法称为抗体介导的酶前体药物治疗。抗体和酶的融合蛋白定位在肿瘤部位后再给予前体药物，提高了肿瘤区域药物的浓度，降低了对正常细胞的毒性。 * 抗体工程 抗体研究进展的三个阶段： 1890年Behring发现白喉抗毒素为代表，特点：用抗原免疫动物来获得多克隆抗体 1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表 1994年Wi