食品微生物第十二章常见致病g.ppt

六、蜡样芽孢杆菌的检测 1. GB 4789.14-94 检样 25g(ml)加225ml生理盐水 制成10-1～10-5的稀释液 选择性培养基（菌数测定）MYP 选择性培养基（分离培养）MYP 菌落计数 营养琼脂 生长及菌落观察 染色镜检 生化试验 菌株保存 报告 六、蜡样芽孢杆菌的检测 2. PCR检测 待扩增特异性目标基因：gyrB 特异性引物: gyrB2F：ATT GGT GAC ACC GAT CAA ACA； gyrB2R：TCA TAC GTA TGG ATG TTA TTC； 目标片段： 365bp 六、蜡样芽孢杆菌的检测（2. PCR检测） M1100bpDNALadder；1.蜡样芽胞杆菌；2.绿脓假单孢菌；3.苏芸金芽胞杆菌；4.蕈状芽胞杆菌；5.产气荚膜梭状芽胞杆菌；6.嗜酸杆菌；7.金黄芽胞杆菌；8.嗜土芽胞杆菌；9.枯草芽胞杆菌。 七、蜡样芽孢杆菌的预防和控制 1. 防止食品被菌体污染 土壤、尘埃、空气是蜡样芽胞杆菌的污染源，昆虫、苍蝇、鼠类不洁的容器及烹调用具可传播该菌。故应采取相应的措施以防止食品污染。 2. 预防蜡样芽胞杆菌食物中毒的措施 主要是不吃馊饭、馊菜，不吃未经彻底加热的剩饭、剩面类食物。 对于确还新鲜不变质的上一顿剩下来的米饭或面条，也应在食用前进行彻底加热后方可食用。 由于蜡样芽胞杆菌在1 6～5 0℃均可生长繁殖并产生毒素，因而，对于奶类、肉类及米饭等食品，只能在低温条件下短时间存放。 七、蜡样芽孢杆菌的预防和控制 复习思考题： 名词解释 血浆凝固酶 葡萄球菌肠毒素 2.简答题 （1）金黄色葡萄球菌的特征性生理生化有几个？请分别说明其鉴定过程及代表意义。 （2）金黄色葡萄球菌的致病类型有那些，请分别说明。 （3）单核增生李斯特氏菌病的临床症状有哪些。 （4）单核增生李斯特氏菌毒力岛的组成基因有哪些？各自有什么功能。 （5）实时定量PCR的工作原理及其应用。 （6）比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌的一般形态特征和培养特征。 （7）简述金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌等菌常用预防措施。 复习思考题： 3. 论述题 （1）金黄色葡萄球菌的致病因子及其相应致病机理。 （2）比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌的一般性生理生化特征。 （3）论述金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌病的常见症状，致病因子相应的致病机理。 （4）论述课堂学习过的六种致病菌引起宿主致病时相同的症状及其原因。 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性 1.形态特征 蜡样芽胞杆菌为革兰氏阳性大杆菌，大小为1～1.3×3～5μm，菌体两端较平整，多数呈链状排列，与炭疽杆菌相似。 形成芽胞，芽胞呈椭圆形，位于菌体中央稍偏一端，芽胞较菌体小 。 引起食物中毒的菌株多有周鞭毛，有动力； 不形成荚膜。 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性（1.形态特征） 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性 2. 培养特征 需氧菌，生长温度范围在4～45℃之间，最适生长温度为28～35℃，最高生长温度48～50℃，最低生长温度4～5℃； pH4.9～9.3条件下均可生长； 生长最低Aw为0.95； 可在浓度为75g/L NaCl中生长； 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性（2. 培养特征） 营养要求不高，在普通培养基上生长良好。普通琼脂平板上菌落为圆形、隆起、呈乳白色、不透明、边缘不整齐、直径为4～6mm、菌落边缘往往呈扩散状、表面稍干燥。 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性（2. 培养特征） 在血液琼脂平板上形成浅灰色、不透明、似毛玻璃状的菌落，呈β型溶血，在菌落周围初呈草绿色溶血，时间稍长即完全透明； 在甘露醇卵黄多黏菌素琼脂平板上，菌落微灰白色或微红色、扁平、表面粗糙，菌落周围有紫红色背景环绕白色晕圈； 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性（2. 培养特征） 在普通肉汤内生长迅速，出现均匀混浊，常常有菌膜或壁环，振摇易乳化。 半固体普通琼脂上穿刺接种后，于30℃培养18~24h，大多数蜡样芽胞杆菌有动力，沿穿刺线向外伸展，无动力的细菌仅在穿刺线内和沿线生长。 3. 生化分型 根据蜡样芽胞杆菌对柠檬酸盐利用、硝酸盐还原、淀粉水解、V-P反应、明胶液化性状等试验，可将该菌分成不同的型别。见下表： 二、蜡样芽孢杆菌的生物学特性 二、蜡样芽孢杆菌生理生化特性（3.生化分型） 型别 柠檬酸盐利用 硝酸盐还原 淀粉水解 v-p反应 明胶液化 1 + + +