细胞膜的通透性.docxVIP

山东大学实验报告 姓名：XXX 系年级：2013级XXXX 学号：201300XXXXXX 科目：细胞生物学实验 题目：细胞膜的通透性 日期：2014/9/23 细胞膜的通透性 实验目的 了解溶血现象及其发生机制。 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度 实验原理 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞涨破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间也不同。因此，发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。 三. 实验用品 1．材料 鸡血 2．试剂 0.85%的Nacl溶液，0.085%的Nacl溶液，0.8mol/L的甲醇溶液，0.8mol/L的丙三醇溶液，6%的葡萄糖溶液，2%的Triton X-100溶液 3．器材 6支试管，离心机，滴管，试管架 四．实验步骤 取鸡血6ml，加0.85%Nacl溶液4ml，在1000r/min条件下离心五分钟。（RBC体积量不少于0.6ML） 将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%的浓度。（总体积应不少于1.2mL） 每组取6支试管，分别加入如下溶液各3Ml (1) 0.85%Nacl溶液 (2) 0.085%Nacl溶液 (3)0.8mol/L甲醇溶液 (4) 0.8mol/L丙三醇溶液 (5) 6%葡萄糖溶液 (6) 2%Triton X-100 4．向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中是否有溶血现象发生（观察时间1小时）,记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液中的细胞。 五．实验结果 不同溶液处理导致红细胞溶血的现象 试管编号 1 2 3 4 5 6 溶液 0.85%Nacl溶液 蒸馏水 0.8mol/L甲醇溶液 0.8mol/L丙三醇溶液 6%的葡萄糖溶液 2%Triton X-100 是否溶血 否 是 是 是 是 是 溶血时间/s 8.9s 9.6s 1h 1h 6.9s 结果分析 该溶液为鸡血红细胞的等渗溶液，不会发生溶血。 该溶液为鸡血红细胞的低渗溶液，细胞会吸水涨破 甲醇溶液为亲脂性的小分子溶液，易通过细胞膜进入细胞，提高细胞的渗透压，使外界的水分子进入细胞，引起细胞吸水涨破 该溶液为高渗溶液，细胞内的水分子会向外流出，小分子丙三醇会进入细胞，但因为丙三醇分子量较大，进入细胞速率较慢，所以不易看到细胞发生溶血现象 高渗溶液，虽然葡萄糖可以进入细胞，但因为分子量比较大，进入速率非常慢，不易见到溶血现象的发生 该溶液可将细胞膜上的蛋白质脱离下来，使细胞发生溶血，同时细胞悬液变得有点浑浊 由表格中溶血时间可看出，蒸馏水和2% Triton X-100处理的红细胞悬液，细胞溶血很快，其次是0.8mol/L甲醇溶液，而0.8mol/L丙三醇溶液和6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液，细胞溶血时间很慢。 不同溶液处理后离心管中鸡血红细胞悬液的透明情况比较。 0.85%Nacl溶液与0.8mol/丙三醇溶液0.85%Nacl 0.85%Nacl溶液与0.8mol/丙三醇溶液 0.85%Nacl溶液与蒸馏水 0.85%Nacl溶液与0.8mol/L甲醇溶液 0.85%Nacl溶液与6%的葡萄糖溶液 0.85%Nacl溶液与6%的葡萄糖溶液 0.85%Nacl 0.85%Nacl溶液与2%Triton X-100 蒸馏水处理后的红细胞，细胞悬液迅速变澄清，证明细胞已发生明显溶血；0.8mol/L甲醇溶液处理的红细胞悬液也很快变澄清，但透明度不如蒸馏水处理的红细胞悬液：0.8mol/丙三醇溶液处理的红细胞悬液变澄清很慢；6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液变澄清最慢；2%Triton X-100处理的红细胞悬液变澄清比较快，但透明度不高，远低于对照试管透明度，说明Triton试剂将蛋白脱离下来，蛋白游离在溶液中。 不同溶液处理后的鸡血红细胞的形态变化 0.8mol/L甲醇溶液蒸馏水 0.85%Nacl 0.8mol/L甲醇溶液 蒸馏水 2%Triton X-1006%的葡萄糖溶液 2%Triton X-100 6%的葡萄糖溶液 0.8mol/ 0.8mol/丙三醇溶液 不同作用时间下的细胞形态 0.8mol/丙三醇溶液 （1） （2） （3） （4） 6%的葡萄