人教版高中生物选修一2-1微生物的实验室培养同步课件.pptVIP

2．提示　相同点：三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养。 不同点：无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件，而其他两种技术都要求严格的无菌条件。 解析　可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。 3．提示　巴斯德设计了一个鹅颈瓶(曲颈瓶)，现称巴斯德烧瓶。烧瓶有一个弯曲的长管与外界空气相通。瓶内的溶液加热至沸点，冷却后，空气可以重新进入，但因为有向下弯曲的长管，空气中的尘埃和微生物不能与溶液接触，使溶液保持无菌状态，溶液可以较长时间不腐败。如果瓶颈破裂，溶液就会很快腐败变质，并有大量的微生物出现。实验得到了令人信服的结论：腐败物质中的微生物是来自空气中的微生物，这个实验也导致了巴斯德创造了一种有效的灭菌方法——巴氏灭菌法。巴氏灭菌法又称低温灭菌法，先将要求灭菌的物质加热到65 ℃ 30 min钟或72 ℃ 15 min，随后迅速冷却到10 ℃以下。这样既不破坏营养成分，又能杀死细菌的营养体，巴斯德发明的这种方法解决了酒质变酸的问题，拯救了法国酿酒业。现代的食品工业多采取间歇低温灭菌法进行灭菌。 解析　这是一道开放性的问题，答案并不唯一，重点在于鼓励学生积极参与，从不同的角度思考问题。例如，正是由于证明了微生物不是自发产生的，微生物学才可能发展成为一门独立的学科；巴斯德实验中用到的加热灭菌的方法导致了有效的灭菌方法的出现，而这一灭菌原理也适用于食品的保存等。 * a．将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。 b．用移液管吸取1 mL已培养的菌悬液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌悬液与水充分混匀。 c．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。以此类推，直到完成最后一支试管的稀释。 注意：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 ②划线或涂布 平板划线分离法：在近火焰处，左手拿皿底，右手拿接种环，挑取大肠杆菌培养液在平板上划线，常用的划线方法有平行划线和连续划线两种。平行划线时，每转一个角度烧一次接种环。划线完毕后，盖上培养皿盖，做好标记。 图2　划线示意图 涂布分离法：取3个平板，底面分别用记号笔写上10－4、10－5和10－6三种稀释度，然后用无菌吸管分别吸取相应稀释度的稀释液各0.1 mL，放入已标记好的平板上，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻地涂布均匀，室温下静置5～10 min，使菌悬液吸附进培养基(图3)。 ③培养 将划线或涂布接种的平板倒置于培养箱或温室中37 ℃培养16～24 h，即可长出单菌落(图4) 图3　涂布法示意图　　　图4　斜面接种法 (3)结果分析 ①确认培养基制备是否合格 为确认培养基制备是否合格，需设置对照实验，即接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 ℃恒温箱中，培养12 h和24 h，观察现象并记录——如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则实验失败需要重新制备。 ②接种操作成功的标准 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合该菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中无菌操作还未达到要求，实验失败，需要分析原因，再次制备。 特别提醒　(1)进行划线时最后一区和第一区不可接触。 (2)平板划线各次灼烧接种环的目的。 平板划线操作第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环，每次灼烧目的不同。 (3)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 第一次灼烧 每次划线之前灼烧 划线结束 目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 灼烧杀死上次划线结束后接种环上残留的菌 种，使每 次划线的菌种来自上次划线末端 划线结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 【巩固2】 下列有关平板划线操作的叙述不正确的是 (　　)。 A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 解析　平板划线操作中，接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种。划线结束仍需灼烧接种环，是为了能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。 答案　C 【例1】 氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境