人教版高中生物选修一5-1DNA的粗提取与鉴定同步课件.pptVIP

思维导图： 深度剖析　当NaCl质量浓度为0.14 moL/L时，DNA溶解度最小，析出物中含有大量的DNA。将丝状DNA溶解在质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺沸水浴加热后呈蓝色。菜花替代鸡血作实验材料，实验操作步骤不完全相同，处理菜花时，先用洗涤剂处理细胞膜。 答案　B [归纳提升]DNA的粗提取原理及目的归纳 基本原理 方法 目的 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低 溶于NaCl溶 液中并稀释 ①NaCl溶液质量浓度为2 mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质 ②当NaCl溶液稀释至质量浓度为0.14 mol/L时，DNA析 出，过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质 DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质 DNA不溶于酒精溶液 加入冷却酒 精(体积分 数为95%) DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质 【例2】 下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置，请回答下列相关的问题。 DNA粗提取实验操作 (1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中有较高含量的________。 (2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是________，通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液的目的是____________________________________ (3)图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是___________________。 思维导图： 深度剖析　题图A、B、C所示为本实验的三个关键步骤。图A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于低渗的环境之中，细胞因大量吸水而最终破裂，并释放出胞内物。图B通过纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的滤液中(将大量胶状物滤出)，再在滤液中加入质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液使DNA的溶解度增加。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，如在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度只有水中的1%，而在质量浓度为1 mol/L的NaCl溶液中的溶解度为水中的2倍。图C在DNA浓盐溶液中加入蒸馏水(大量)，可使溶液的NaCl浓度降至较低，由于DNA在较低浓度的NaCl溶液中溶解度很低(在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，浓度再变小则DNA溶解度将增大)，使DNA低渗析出，经过滤等手段可以收集到DNA。 答案　(1)DNA　(2)使血细胞破裂　使滤液中的DNA溶于浓NaCl溶液　(3)使DNA析出 易错提醒　DNA粗提取操作中两次加入蒸馏水及三次过滤的目的分析： (1)实验过程中两次加入蒸馏水，操作目的各不相同：第一次加蒸馏水，目的是使血细胞通过吸水涨破，释放出核内的DNA；第二次加蒸馏水，目的是稀释氯化钠溶液，使其浓度降至质量浓度为0.14 mol/L，最终使大量DNA析出。 (2)在DNA粗提取中三次过滤时，DNA存在的部分及所用的纱布层数不同： 第一次过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，是为了得到含DNA的滤液，使用的纱布为1～2层。 第二次过滤含有黏稠物的NaCl溶液，是为了得到从低浓度的NaCl溶液中析出的附着在纱布上的含DNA的黏稠物，所用的纱布为多层。 第三次过滤溶解有DNA的NaCl溶液，目的是为了使DNA再溶解，所以只要用两层纱布即可。 单击此处进入 随堂达标检测 旁栏思考题 1．为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 解析　鸡血细胞与外界溶液相当于一个渗透系统，在蒸馏水中会发生渗透吸水，使细胞胀裂。 答案　蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA。 2．加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 答案　洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。 3．如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？ 答案　研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。 4．此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 解析　破碎的细胞通过过滤后，只能将体积较大的杂质除去，而与DNA体积相近的蛋白质、多糖和RNA等大分子物质都还存在。 答案　可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。 5．为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？ 答案　用高浓度的盐溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质