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教学目标 了解动物细胞融合的原理、过程和意义。 理解单克隆抗体制备的过程和应用 重点难点 1.教学重点： 单克隆抗体的制备和应用 2.教学难点： 单克隆抗体的制备过程 问题探讨 2.3单克隆抗体的应用 * * * 海南省文昌中学 生物组 林春娘 “番茄—马铃薯”（理想图） 通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？ 动物细胞也能融合吗？ A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 一、动物细胞融合 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞 诱导的手段？ 融合后细胞的类型？ AB杂种细胞遗传物质有什么点？ 三种AA、AB、BB（A、B） 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理？ 为什么灭活的病毒能作诱剂？ 灭活丧失感染性 保留融合活性 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 细胞膜的 流动性 动物细 胞融合 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 细胞膜的 流动性 植物体 细胞杂交 用途 诱导手段 细胞融合的方法 细胞融合的原理 比较项目 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。 二、单克隆抗体 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞 记忆B淋巴细胞 分化 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体！ 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 2.1单克隆抗体的概念 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 2.2单克隆抗体的制备 ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？ ①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ 获得产生相应抗体的B细胞 ② 会有几种融合方式？ BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） √ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ 选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体， 又能大量增殖。 ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ 选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内培养 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 治疗疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗， 单克隆抗体作为载体， 运载抗癌药物，形成“生物导弹”， 准确杀伤癌变细胞。 “生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物 单抗导向，药物为弹头 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。 （2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是_________________________________________。