毛细管电色谱的方法原理与应用.pptVIP

2．紫外-可见检测器开启电源后，经过短暂的时间，氘灯点亮，波长显示为254 nm。(不一定是254nm，而是上次关机时使用的波长)，按FUNC/BACK键到改波长处，输入实验需要的波长值， ENTER确认，检测器一般30-60min的预热，然后按ZERO基线调零后，基线稳定后，可以进样。 注意：开色谱软件前要把微流控单元的开关打开。否则软件打不开。 3．高压电源输出电压：0-30kV；电流：0-100μA；最大功率：1W注意：当设置10kV以上电压时，应设置较长升压时间（如10秒），突然升压可导致破坏性后果；当环境潮湿时，不要设置超过10kV的电压。3．1 开机后，按MENU ，以上下箭头选择分析模式：电色谱 CEC 或电泳CE，ENTER确认 3．2 以上下左右箭头输入电压（最小单位100V）、升压时间和电场方向+/-，ENTER确认。确认检测器和微流控制单元仓门关闭、背板电缆连接正确，按RUN 执行注意，改变电压输出极性时，还要改变后面板高压线的插孔位置，设置输出为正电压时，后面板高压线插在“HV+”孔，设置输出为负电压时，后面板高压线插在“HV-”孔，地线始终接在“HV0”孔不变；设置好输出电压极性，按ENTER键 确定 3．3 CE 模式下，还需输入电动进样的电压和时间。把进样条件和运行电泳的条件设好后，首先运行一下RUN ，按RESET键断电后按INJECT ，系统执行进样设置，完成后电压降至0。（每次改条件后都要先运行一下RUN后才能进样）3．4 RESET键：进样、升压时按下，电压降至0；分析完成，按此键退至上级菜单。 装柱： 1.装柱前首先把毛细管检测窗口和检测池装检测窗口的位置都用分析纯的乙醇擦干净，等乙醇挥发完后，可以装柱。（注意不要用口吹干） 2.把柱子的检测窗口对准检测池的小球，对着光看，是透光的说明位置正好 3．固定柱子的PEEK螺丝的PEEK管要插到底部固定螺丝，否则毛细管装好后还会移动。 4．然后盖上盖子，按对角顺序上四个螺丝并固定住。（注意不要一次性拧紧一个螺丝） 5．螺丝固定后，把出口端的毛细管插到PEEK管里，把池子安装到检测器上， 6．打开检测器，自检结束后，按FUNC/BACK 滚动至看Sample和reference 值是否正常，如果sample值太小，说明柱子没装好。 7．卸柱子时，一定要把柱子出口端的毛细管从PEEK管里拔出，是毛细管柱子处于自由状态后才卸四个螺丝。否则容易把柱子折断。 分析样品 1．确认各部分正确连接，开启电源，启动数据采集软件UnimicroTriSep Workstation。设置参数及程序，平衡色谱柱 2．设置工作站信号采集时间等，工作站工具栏绿色示意灯状态，准备采集信号 3．当进样控制面板的LOAD灯亮时，用微量进样器进样，此时，样品被注入到进样阀的定量环中，定量环的体积是固定的2 ? l（本系统中见入毛细管柱内的样品量通常是10 ? L或20 ? L），与实际进样量无关，多余的样品会流到样品废液瓶中。但应注意，由于在进样孔与进样阀之间存在一个连接管，其体积约10 ?L，因此，每当进一个新的样品时，第一次进样的进样量要大于40 ?L，以确保样品置换了进样管路里所有的溶液到达进样阀的定量环，以后每次进样，进样量只须5?L即可。要将样品注入色谱柱中时，按进样控制面板上的按键，经过约1 s后，INJECT灯亮，表示样品池已被连入流路系统，样品开始进入色谱柱。当INJECT灯亮时系统自动开始采集数据。同时需按下主泵RUN键开始梯度程序、高压电源RUN 启动高压电场。 4．分析结束，存储色谱数据，RESET停止高压。 5．清洗色谱柱、仪器管路、进样针，进样口；关闭各部分电源；填写使用记录。 谢 谢！ 放映结束 感谢各位批评指导！ 让我们共同进步 * * * * * 加压毛细管电色谱仪的原理及应用 Capillary ElectrochromatographyAdvances and Applications CEC基本原理 1微型分离技术 2micro-HPLC 和 CE的结合 3电渗流 (EOF) 为流动向的推动力 4二维分离机理：液相色谱和电泳之和（分配和电泳淌度） 历史回顾和研究现状 一、毛细管电色谱发展进程 1952年Mould 和Synge[2]首次在色谱分析上使用了电渗流，他们在薄层色谱上利用电场分离了胶棉中的多糖化合物。 1974年Pretorius[3]才首次成功地实现了在填充毛细管液相色谱中用电渗流取代泵，并获得了比传统液相色谱高的柱效能，但是由于Pretorius当时所用的柱子管径较大 ，因此CEC的优越性没有得到充分展示，所以在70年代后期 ，此法没有得到充分重视。 直到1980年Otsuka[4]