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大豆异黄酮的提取Soybean Isoflavone实验守则安全第一,实验全程要穿实验服。取用有毒有害的试剂一定要做好防护措施。配好的试剂贴上标签,写上日期、姓名和试剂名称。维护和爱惜实验室的仪器、设备。做完实验一定要收拾实验台、搞好卫生。药品、试剂归位。实验结束后,到我这签字,检查后才能离开。没签字的计旷课处理。最后离开实验室的同学关水电、门窗。一、大豆异黄酮概述大豆含有大量活性成分,被人们称为“功能性成分宝库”。大豆异黄酮(Soybean Isoflavone)是大豆生长中形成一类次生代谢产物,属于黄酮类化合物中异黄酮类成分,主要是指以3–苯并吡喃酮为母核化合物。常温下大豆异黄酮性质稳定,易溶于醇类、酯类、酮类溶剂和稀碱中,不溶于水,难溶于石油醚、苯、正己烷等非极性有机溶剂。大豆异黄酮是生物黄酮一种。自然界中异黄酮资源十分有限,主要来源于豆科植物荚豆类、葛根等少数植物,其中以大豆含量较高,为 0.1%~0.5%。? Bioactivities of Soybean Isoflavone抗癌Soybean Isoflavone抗妇女更年期综合症抗心血管疾病抗骨质疏松症二、大豆异黄酮的提取 实验原理有机溶剂萃取法是国内外提取异黄酮使用在广泛的方法,常用的有机溶剂主要有:乙醇、甲醇、乙酸乙酯以及它们的水溶液。在有机溶剂萃取法中最常用的溶剂为乙醇,即醇提法。提取过程中,乙醇的浓度对提取结果有较大的影响。一般认为,乙醇浓度高有利于异黄酮的提取,但这还跟异黄酮物质的某一特定结构有关,高浓度乙醇适用于提取游离型的苷元,低浓度的乙醇适用于提取糖苷形式的异黄酮。乙醇溶液提取异黄酮豆渣过滤干燥脱脂冷却离心回收上清液2 实验提取工艺流程图 3 单因素试验设计 4 大豆异黄酮的测定 (1)标准曲线的制作: 准确称取标准大豆异黄酮5 mg,用无水乙醇定容至50 mL,即标准液。分别准确移取标准液0.1,0.5,0.8,1,2,5 mL 于10 mL 容量瓶中, 加乙醇定容,260 nm处测定其吸光值,得到的大豆异黄酮标准曲线方程。 (2)样品液中大豆异黄酮含量的测定: 取一定量样品液直接在260 nm处测定其吸光值,计算异黄酮浓度,再计算异黄酮的提取率。 (3)实验结果处理W = ( C * V / M ) * 100W:大豆异黄酮的得率;C:大豆异黄酮的浓度(mg/mL);V:大豆异黄酮提取溶液的体积(mL);M:大豆粉的质量(mg)。三、实验结果与分析 影响大豆异黄酮提取率的因素有哪些,对提取率有哪些影响?
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