Bcl-x选择性剪接微基因报告方法的建立.pdfVIP

摘 要 因组 片段 : p lp Z ，p 3p 4 : 2.定 向克 隆 的方法 成 功地 构建 出人类 凋 亡相 关基 因 be l一x 的微 基 因 ;反 向 P C R 方 法 成 功 地 构 建 出 be l一x 相 关 顺 式 作 用 元 件 的 突 变 微 基 因 : P eD N A 3.1(一)一b el一x一B ZG (M ) 、P eD N A 3.1(一)一bcl一x 一C R C E I (M )、P eD N A 3.l (一)一b el一x- C R C E Z (M ) ; 3.bd 一x 微 基 因 及 其 突 变 微 基 因 均 能 在 H L 60 细 胞 内进 行 转 录 ， 并 且 bel一xL /b el一x s m R N A 的 比值 受 顺 式 元 件 B ZG 、C R C E I、C R C E Z 的影 响 : 顺 式 作 用 元 件 B ZG 缺 失 和 C R C E I 突 变 使 be l一x s 几 乎 消 失 ，C R C E Z 突 变 也 使 bcl一xL /b el一x s 比值 上 升 。 关键 词 : 选 择 性 剪 接 ; be l一xL/be l一x s ; 细 胞 凋 亡 ; 顺 式作 用 元 件 ; 反 式 作 用 因子 ; 微 基 因报 告 法 A b stra et A B S T R A C T O bjeetiv e : A ltem a tiv e sP lie in g 15 a P ro e e ss b y Wh ich th e ex o n s o f th e R N A P ro d u e e d b y P re 一m R N A are re co nn e ete d in m u ltiP le w a y s d u rin g R N A sP lic in g . Th e resu ltin g d iffe ren t m l州 A s m ay b e tran slate d in to d iffe ren t P ro te in iso form s : th u s，a sin g le g en e m a y c o d e for m u ltiP le P ro te in s.A ll hu m a n g en e s e o n ta in a d iv erse arr a y o f c is一a ctin g e lem en ts w ith in in tro n s a n d ex o n s th a t are req u ire d for co rre e t an d e ffi c ien t Preeu rsor m essen ger R N A (Pre一m R N A )sP lieing . T h e abnorm al sP licin g m ay lead to so m e d ise a se s. M in ig e n e m e an s th a t th e re lev an t g en o m ie D N A fra g m e n t 15 e lo n e d w ith in a P la sm id b e tw e en th e P rom o ter an d th e sto P co d e ，th e re eo m b in a n t P la sm id ea n tran serib e m R N A in eu eary o tie e e lls an d sP lic e in to d iffe ren t m R N A in d iffe re