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化学发光免疫检测仪涉及的关键技术 . 第卷第期 . 发 光 学 报 年月 .. 文章编号:?? 化学发光免疫检测仪涉及的关键技术 赵建文 陈艳宁.路士州 .哈尔滨工业大学威海数字化医疗装备山东省重点实验室,山东威海 .哈尔滨医科大学附属三院检验科,黑龙江哈尔滨 摘要:为实现化学发光免疫检测方法的临床应用,在深入分析化学发光免疫检测过程的基础上,对其涉及的 各项关键技术进行了研究。针对化学发光免疫检测过程的个关键环节:加样、洗涤和测量,提炼出化学发光 免疫检测仪涉及的项关键技术:微量液体试样精确加样技术、免疫复合物充分无损分离技术、微弱闪光信号 精确测量技术。在液体加样方面,通过微升级别液体加注过程的分析及仿真给出加样模块相关参数的优化 原则;在免疫复合物分离方面,通过复合物颗粒磁分离过程的分析给出磁场设计原则;在光检方面,给出了测 量室设计原则及光电信号数据处理原则。在攻克上述关键技术的基础上,研制出 化学发光免 疫分析仪并成功实现临床应用。测试结果表明,仪器的变异系数 ,为%.最大检 测速度为每小时次,达到国外同类高端仪器的水平,表明所研究的关键技术是可行的。 关键词:化学发光:免疫检测;医疗仪器 中图分类号: 文献标识码: :./. . ?, ?, .喀 ,‖‘ , ,; ., , ,?:巧, : , ., :,? : .,? , , . , . ? , ,. ,?. ,%./. 收稿日期:?一:修订期:.? 基金项目:国家“”计划;国家自然科学基金资助项目 作者简介:赵建文一,男,黑龙江宁安人.博士,主要从事数字化医疗装备及医疗机器人方面的研究。 ?:.,: 万方数据 发 光 学 报 第卷 ? . :;; 物中加入双氧水和氢氧化钠溶液统称为激发 引 言 液。通过氧化反应使异鲁米诺标记物跃迁至不 免疫分析是临床诊疗的重要手段,包括病毒、 稳定的高能激发态,在原子回迁到基态的过程中 激素、肿瘤标志物等多类检测项目。化学发光免 发出闪光,进而通过测量光能获得样本中待检物 疫分析是继放射免疫、荧光免疫、酶免疫分析之后 的浓度信息‘剖。 发展起来的最新免疫检测技术,具有灵敏度高、检 测范围宽、标记物稳定性好等优点.最高可实现 攀:苗:耖固 十一水讲 体也砖 ;九涤隙 .夸 。 /微量测定.是免疫分析领域的主要发 的磁球 抗妣“己。 展形式【引。 但目前国产的免疫分析仪仍以酶免疫为主. 通≮◆:、 ’’ ‘妒¨【 ,救心液 ~似水:段圯 尚没有完全掌握化学发光免疫检测技术:而国外 幽 直接化学发光免疫检测原理不崽倒 仪器只允许本厂试剂进行检测,导致免疫检测费. 用很高。只有开发自主仪器,打破国外仪器垄断 由化学发光免疫分析原理可知。检测过程包 局面,才能促进国产免疫试剂行业的发展。 含个环节:加样??孵育??洗涤??光检.分 在化学发光免疫检测方面,目前公开的文献 主要是面向检贝方法,研究生物学特性和环境物 别用于完成样本和试剂包括磁珠、标记物和稀 理参数对检测结果的影响引.无法直接转化为 释液加注、抗原抗体的恒温特异结合、免疫磁珠 技术移植到免疫检测仪中。因此,只有攻克化学 的洗涤和分离、闪光的快速检测。其中难度最大 发光免疫检测仪涉及的各项关键技术。才能开发 的环节是加样、洗涤和光检,涉及的关键技术包 出自主仪器,并逐步提高检测速度和检测结果 括:微量液体试样的精确加样技术、免疫复合物的 精度。 充分无损分离技术及微弱闪光信号的快速检测 技术。 化学发光免疫检测原理 微量液体试样的精确加样技术 化学发光免疫检测的基本思想是:利用生物 免疫技术实现待测物、发光标记物与靶物质的特 分析仪检测精度提高的同时也对加样精度提 异结合,令其在碱性环境下发光,释放的光能与待 出了更高的要求。这体现在两方面:一是病人血 测物浓度单调对应,进而通过汉定光能间接得到 清的加注量直接影响待测物浓度的计算.精确加 待测物的浓度。目前流行的靶物质为免疫磁颗 样才能保证精确可靠的检测;二是测试中一些加 粒,即包被抗体或抗原的铁氧体颗粒,它可以被磁 样试剂价格昂贵例如磁珠,加样量大造成检测 场束缚,便于物质分离:发光标记物通过将化学发 成本提高,加样量小检测信号不明显。影响检测结 光剂吖啶酯或异鲁米诺标记在抗体上得到。 果。实际操作中,磁珠的加样体积设定在微升级 化学发光免疫检测的基本过程如图所示。在恒 别,因此对加样任务提出了挑战。为实现微升级 温条件下实现待测物图中的样本抗原、标记物 别液体的快速精确加样,本文采用非接触加样方 图中的异鲁米诺标记抗体与靶物质图中的磁 式,并通过液体加注过程的分析来优化相关参数。 珠的特异性结合,获得免疫复合物颗粒三者的 样本包括血清和试剂供给回路如图所 结合体;然