循环肿瘤细胞捕获、精确操控和数字PCR技术在肝癌转移复发中的应用研究.ppt

逆转录怎么实现，液液还是液固 * * 基于RNA-seq生物信息学结果，建立肝癌靶向转移和索拉菲尼耐药分子新标签 临床大样本中使用数字化PCR验证分子新标签的临床价值 * 工作原理：利用 * * * 1.利用聚合物PDMS软光刻和螺丝微阀技术制作了单重/多重集成性LAMP微芯片，有效地整合了核酸提取，扩增和信号检测，达到了sample-to-answer 的诊断效果。1μLAMP仅需约10 μL 的原始样品，可以在45 min 至60 min内直接通过肉眼快速判定被检样品中是否含有被测病原体。 2.可用于肿瘤细胞的高通量和可视化检测。这种微流控芯片能够在30 min内完成7个细胞样品的同时分析（40?L）。有望应用于肿瘤的细胞水平早期筛查。 3.利用多相微流控芯片高效的反应优势，同时将液滴微流控芯片作为色谱和质谱的接口，构建了可用于蛋白样本分离-酶解-原位富集-鉴定的新技术 * 液体流速的精确控制灌流系统：由进样阀、电机和电控盒等部分组成、通过电机控制六通道进样阀，实现测量中各种通道和清洗试剂的自动切换 项目仪器组运用UIS光学系统构建光学检测模块，能有效检测到微弱的荧光信号，并且优化了多色观察，生成高质量图像 利用大幅图像完整拼接技术、边缘识别技术，实现阳性细胞计数功能 * 复旦大学微流控基础研究与应用实验室，在微流控芯片技术肿瘤细胞可视化检测方面取得了一系列创新性成果 作为首席单位主持973项目“微流控学在化学和生物医学中的应用基础研究” 实验室面积为3000m2，拥有荧光共聚焦显微镜、流式细胞仪、生物质谱、原子力显微镜、场发射扫描电镜等与本课题相关的各种大型分析仪器 复旦大学课题组 上海交通大学课题组 上海交通大学微纳科学技术研究院是国防重点实验室、教育部重点实验室，国内较早从事MEMS的基地，非硅加工处于国内领先地位 实验室面积为5000m2，净化室面积为1400m2，拥有等离子硅深刻蚀机、MA6光刻机、离子铣机、薄膜溅射机等各类大型加工设备 国内较早开展微流控工作的单位，曾获教育部自然科学奖一等、二等奖和上海市科技进步一等奖 上海理工大学课题组 由庄松林院士领导，是全国最早设立“光学工程”的学校之一，工程光学国家重点学科 研究院所属实验室面积为8000m2，拥有开展光学系统研究的各类大型设备 近三年承担和参加国家973 计划项目5 项，国家科技支撑计划4 项、国家自然科学基金项目近30 项、国家重大科学仪器专项6项 -研究目标和内容 -技术路线和任务指标 -任务分工和支撑条件 -研究进度和经费预算 汇报内容 研究进度 年度 年度节点目标 2015年 CTC分选系统各硬件模块组装 设计及制作单细胞操控芯和数字PCR芯片 2016年 CTC分选系统的软硬件系统 单细胞操控芯片和数字PCR芯片定型 100例肝癌标本库构建 50个CTC的RNA-seq和数据分析工作 申请1-2项专利，完成SCI 2-3篇 2017年 完成单细胞操控芯片和数字PCR芯片优化工作 100例肝癌标本库构建 验证2-3个CTC关键基因或信号通路的功能 验证2-3个肝癌转移复发预测和疗效实时监测CTC分子标签 完成全部研究任务指标，完成结题报告 国家863科技计划课题预算表 ? ? ? ? 金额单位：万元 序号 预算科目名称 合计 中山医院 复旦大学 上海交大 上海理工大学 1 一、经费支出 600 240 120 120 120 2 （一）直接费用 543 221 110 102 110 3 1、设备费 67.1 6.5 2.1 27 31.5 4 （1）购置设备费 67.1 6.5 2.1 27 31.5 5 （2）试制设备费 0 0 0 0 0 6 （3）设备改造与租赁费 0 0 0 0 07 2、材料费 213.2 87.8 52.4 33 40 8 3、测试化验加工费 116.5 79 10.5 15 12 9 4、燃料动力费 6.5 0 0 5 1.5 10 5、差旅费 19.8 3 10.8 3 3 11 6、会议费 8.5 3 3 1 1.5 12 7、国际合作与交流费 28.5 9 13 3.5 3 13 8、出版/文献/信息传播/知识产权事务费 16 5 5 2 4 14 9、劳务费 60 24 12 12 12 15 10、专家咨询费 4.4 1.2 1.2 0.5 1.5 16 11、其他支出 2.5 2.5 0 0 0 17 （二）间接费用 40 12 6 16 6 18 其中：绩效支出 ? 7 4 2 4 19 二、经费来源 600.00 240 120 120 120 20 申请从专项经费获得的资助 600.00 240 120 120 120 感谢各位专家指导！ CTC单细胞数字