小鼠脾脏细胞原代培养和观察计数.docVIP

. . 小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数 【实验目的】 学习掌握细胞培养的基本原理以及具体方法.并对小鼠脾细胞进行原代培养； 掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用； 学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法； 学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数； 【实验原理】 细胞培养 细胞培养指的是在无菌条件下.把动、植物细胞从组织中取出.在体外模拟体内的生理环境.使离体的细胞在体外生长和繁殖.并且维持其结构和功能的一种培养技术。动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。从供体获得组织细胞.在无菌条件下.用胰蛋白酶消化或机械分散等方法.将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法称为细胞的原代培养。当培养的动物细胞生长增殖达到一定密度.形成致密的单层细胞时.用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞.从一个容器中以1：2或其他比例转移到另一个容器中扩大培养的方法.称为细胞的传代培养。传代培养的累计次数就是细胞的培养代数。 高等生物是由多细胞构成的整体.在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的。但如果把活细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究.则要方便和简单得多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料.对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类揭开生、老、病、死的规律.探索优生、抗衰老和防