传代细胞培养实验.pptVIP

传代细胞培养实验 指导教师：费晓方 2005年5月 掌握无菌操作技术。 了解传代细胞的培养的一般方法与步骤。 了解培养细胞的消化分散。 了解细胞计数方法。 了解培养液配制方法。 了解倒置显微镜的使用。 实验目的和要求： 实验原理： 细胞培养是将机体内的某组织取出，分散成单细胞，在人工条件下培养使其生存并不断生长、繁殖的方法。借助这种方法可以观察细胞的分裂繁殖、细胞的接触抑制、以及细胞的衰老，死亡等生命现象。还可以利用培养细胞制备染色体，分析外界因素（如理化因素）对细胞的影响，研究细胞癌变等等。在细胞培养的基础上发展了细胞融合、细胞杂交等细胞工程技术及单克隆抗体技术。 动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从有机体获取的细胞进行的培养是原代培养，若将培养细胞洗脱后转移到另外的容器中进行在培养叫做传代培养。 目前，动物细胞培养技术已经达到一个新的阶段：从不同分化组织衍生得到的许多类型的细胞能够成功地在培养液中生长、反复传代。在维持一个独特细胞系长达数月的过程中，记录下细胞的倍增次数和生长速率是很有用的，以便在合适的时间传代以及在体外生活是中不同时间冻存细胞。 实验内容： * 早期细胞培养，依靠的是精湛的操作技术和尽可能的靠近火焰一达到细胞的无菌化。 * 目前，超净台是使工作台无菌化最经济有效的手段。 （1）超净台的选择，应选择层流超净台。不能选择平流超净台。超净台应该