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细胞循环连续发酵讨论 循环与不循环相比: 在转化率和发酵罐体积不变时,可提高生产能力。 在生产能力和发酵罐体积不变时,可提高转化率(CS降低) 在生产能力和转化率一定时,可减小设备体积。 如果细胞不浓缩, D =μ,对CSTR无意义。 生产能力的提高在于提高了发酵罐中的细胞浓度。 第五章微生物细胞反应动力学 一、基本概念 1、微生物反应动力学反应速率的描述 (1)绝对速率(单位时间单位体积变化量,也简称速率) 分批培养细胞生长速率: (g/L.h) 同样底物消耗速率、产物生成速率可分别写成: (g/L.h) (g/L.h) (2)比速率 是以单位质量细胞为基准表示各组分的变化速率。 细胞生长比速率 : 底物消耗比速率: 产物生成比速率: 氧消耗比速率: 微生物细胞生长比速率μ在细胞生长中具有重要意义,其大小影响细胞生长速率。 生长比速率μ大小,与微生物种类、环境、营养等有关。 对一定的微生物,在一定条件下,当营养充足时, μ= μmax,是常数,积分得到: 2、细胞反应过程的得率系数 (1)相对底物的细胞得率系数 定义: 分批培养瞬时得率系数可写成: 总的细胞得率系数可写成: 1)延滞期 μ= 0 2)加速期 0<μ<μmax 3)对数期 μ= μmax 4)减速期 Monod方程: 二、微生物间歇培养 ㏑(CX/C0) t 延 滞 期 加 速 期 对 数 期 减 速 期 平 衡 期 细胞生长曲线 如左图所示: V –发酵罐(生物反应器)有效容积(L) F –培养基体积流量(L/h); CS0 –底物初始浓度(g/L); CS__—发酵罐内底物浓度(g/L); CX—发酵罐内菌体浓度(g/L); 三、单级连续发酵(培养) VμCX CS F CSo CXo F CS CX CX0- 初始接种菌体浓度(g/L); 生长比速率与稀释率的关系 发酵罐浓度视为均一 开始接入微生物细胞(连续进料后不再加入),当连续稳定进料一定时间后,对细胞平衡: 生长量=排出量 VμCX=FCX 令: D- 稀释率(h-1) 即:μ=D 稀释率是人为控制的,因此在连续发酵过程生长比速率可以人为控制。 连续发酵的必要条件 D<μmax 当D>μmax,发酵就发生“冲出”现象。 * * * * * * 连续发酵μ随着D的变化而变化,自动趋向稳态,即μ=D 底物浓度(CS)与稀释率的关系: 菌体相对基质得率系数Yx/s 菌体浓度与稀释率的关系 微生物细胞生产强度(PX)与稀释率的关系 菌体浓度(CX)、底物浓度(CS)、生产强度(Px)与稀释率(D)的关系作图如下: D(h-1) Dopt CX DCX CS DCX CX CS Dc 从上图看出: 1)在一定的稀释率下,微生物细胞生产强度(生长速率)(DCX),随着稀释率(D)增大而增大,当达到一定的稀释率后,其细胞生产强度随着稀释率增大而降低。 2)稀释率在一定范围内变化,细胞浓度(CX)和底物浓度(CS)变化很小。当增大到一定程度,其变化迅速增加。 3)稀释率增大到一定程度时,微生物细胞冲出,罐内菌体浓度为零,底物浓度等于初始浓度,此时的稀释率称临界稀释率(DC)。 4)对细胞生产强度而言,有一个最佳稀释率(D0pt),即细胞生产强度最高。 5)稀释率越小,底物浓度越低,细胞产率越高(转化率高)。 单罐连续发酵(培养),当转化率要求不高时,可以使用。如果既要转化率高,又要细胞生产强度高,单罐连续发酵就满足不了这个条件。 如何设计才能使转化率和生产强度都高,用多级串联连续就能解决这个问题,一般用两个罐就可满足生产要求,第一个罐用作提高生产强度,第二个罐用作提高转化率。 四、最佳稀率(Dopt) 最佳稀释率是细胞生产强度 (生长速率)最大时的稀释率。 生产强度对D求导,等于零,即求得稀释率最大值Dopt 最佳稀释率对应的最佳细胞浓度(CXopt)及最大生产强度(PX)opt 五、两级串联连续发酵(培养) F CSo CXo μ1CX1V1 CS1 μ2CX2V2 CS2 F CS2 CX2 F CS1 CX1 连续稳定时,CX0=0 对第一个罐细胞平衡: 对第二个罐细胞平衡: 两罐串联与单罐连续发酵时间的对比 假定用两个罐(等体积)串联连续发酵,第一个罐的菌体浓度为第二个罐的0.85倍。即:CX1=0.85CX2
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