抑癌基因P53促进血管平滑肌细胞凋亡.PDFVIP

612 中国循环杂志 2017 年 6 月 第 32 卷 第 6 期（总第 228 期）Chinese Circulation Journal，June，2017，Vol. 32 No.6（Serial No.228） 基础与实验研究 不同端粒片段通过沉默信息调节因子 1/ 抑癌基因 P53 促进 血管平滑肌细胞凋亡 吕娟，王红 摘要 目的：研究不同端粒寡核苷酸序列对大鼠胸大动脉平滑肌细胞（A7R5） 凋亡的影响，及沉默信息调节因子 1 （SIRT1）/ 抑癌基因 P53（P53）信号通路是否参与调控端粒寡核苷酸序列诱导 A7R5 的凋亡。 方法：将三种端粒重复序列端粒寡核苷酸序列的二聚体、四聚体、六聚体 [TE-12（TTAGGG） 、TE-24（TTAGGG） 、 2 4 TE-36（TTAGGG）6 ] 转染至 A7R5，分别作为 TE-12 组、TE-24 组、TE-36 组，另设 A7R5 空白为阴性对照组。应用 流式细胞仪检测各端粒寡核苷酸序列转染后 A7R5 的凋亡情况。采用逆转录多聚酶联反应（RT-PCR）及蛋白免疫印迹 （Western-blot）检测 TE-12 组、TE-24 组、TE-36 组及阴性对照组 SIRT1、P53 基因及蛋白水平。 结果：将 TE-12、TE-24、TE-36 成功转染进 A7R5，各组转染率差异无统计学意义。TE-12 组 A7R5 凋亡率明 显高于 TE-36 组、TE-24 组和阴性对照组，TE-24 组细胞凋亡率最低，但亦明显高于阴性对照组，差异均有统计学 意义（P 均 0.05）。TE-12 组 A7R5SIRT1mRNA 及蛋白水平明显高于 TE-36 组、TE-24 组和阴性对照组，差异均有统 计学意义（P 均 0.05）。TE-24 组 A7R5P53mRNA 及蛋白水平明显低于 TE-36 组、TE-12 组和阴性对照组，差异均有 统计学意义（P 均 0.05）。 结论：端粒寡核苷酸序列促进 A7R5 的凋亡。不同结构的端粒寡核苷酸序列引起 A7R5 凋亡程度不同，在选取的三 种结构中，端粒单链序列 TE-12 引起 A7R5 凋亡最明显。端粒寡核苷酸序列对 A7R5 凋亡的作用可能与 SIRT1/P53 信号 通路有关。 关键词 寡核苷酸类 ; 肌 , 平滑 , 血管 ; 凋亡 Different Telomere Fragments Promote Rat’s Vascular Smooth Muscle Cell Apoptosis by Silent Information Regulator 1/Cancer Suppressor Gene P53 LV Juan, WANG Hong. Kunming Medical University, Kunming General Hospital of Chengdu Military Region, Kunming (650031), Yunnan, China Corresponding Author: WANG Hong, Email: wangh43@126.com Abstract Objective: To study the influence of different telomere oligonucleotide on rat’s thoracic aortic smooth muscle (A7R5 ) cell apoptosis and to clarify weather silent information regulator 1 (SIRT1)/cancer suppressor gene (P53) signaling pathway involved in oligonucleotide induced cell apoptosis. Methods: 3