中国药典2010年版－－显微鉴别法二.pptVIP

显微鉴别法 1 简述 药材及成方制剂显微鉴别法就是应用动植物细胞、组织学和矿物晶体光学等知识鉴别中药材或中成药的一种方法。通常是借助显微镜进行观察，故通称“显微鉴别法”。此法适用于： (1)药材性状鉴别特征不明显或外形相似而组织构造不同； (2)药材破碎不易辨认或区分： (3)药材呈粉末状或为成方制剂； (4)用显微化学方法确定药材中有效成分在组织中的分布状况及其特征。 在进行显微鉴别时，首先要将“检样”制成适于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片，对于粉末药材(包括丸、散等中成药)可直接装片或作适当处理后制片。 药材切片标本的制作方法较多。在药材鉴定的研究工作中往往将其制成石蜡切片(永久切片)，因制成的石蜡切片外形较完整，厚薄均匀，且可制得连续切片，观察时方便，又能长期保存。但由于制片技术复杂，费时太多，不适于日常药检工作。所以在中药鉴定工作中通常采用滑走切片或徒手切片法制片， 为观察叶类、花类及全草类药材的叶片、花冠、萼片、苞片等的表皮组织，还需要将其制成表面片，为清楚地观察比较坚硬的细胞组织，如导管、纤维、石细胞等的形态，往往还要进行“解离组织”后装片；观察花粉粒、孢子等的形态特征或构造，需用花粉粒与孢子制片法制片，观察矿物药或有些坚硬的动物类药材如珍珠、石决明及动物骨骼，可采用磨片法制片。这些镜检标本片一般都是在观察前临时制备，故统称其为“临时制片技术”。 2 仪器和用具 2.1 仪器 生物光学显微镜(最好具2.5X或4X物镜头及偏光镜)、显微描绘器、滑走切片机或徒手圆筒生物切片器、镜台测微尺、目镜测微尺、离心机。 光学显微镜的构造 1.机械部分、 2.照明部分、 3.光学放大部分 1.机械部分： 1）、镜座：基座，稳定和支持整个镜体。 2）、镜柱：支持镜臂。 3）、镜臂：支持镜筒，拿镜时握持此臂。 4）、镜筒： 5）、物镜转换器：物镜孔，可安装不同放大率的物镜。 6）、镜台： 7）、调节器：分粗调和细调，细调在一圈范围内调 2、照明部分： 1）、反光镜 (光源)：强时用平光镜，弱时用凹面镜。 2）、聚光器 3）、光圈光阑。 3、光学放大部分 1）、目镜：5X，10X，15X，内可放测微尺 2）、物镜：低倍，镜筒短，筒径粗，5X。 高倍，镜筒长，筒径细，40X，45X。 油镜：镜筒最长，80X，85X。 光学显微镜的使用 （一）、低倍镜的用法 1）、取镜：注意小心平稳轻放。 2）、准备： 3）、对光： 4）、上片：注意有盖玻片的向上，注意取盖玻片时的拿法。 5）、调节物距：注意先把低倍镜调至距玻片0.5厘米的样子——粗调——然后缓慢使物镜上调，直至视野里出现可见物。 注意两个要领：一是慢，二是距离只允许调大不允许调小。 标本片与物象移动方向相反。 如果调过了必须从头再来一次，直至视野里出现物象。 （二）、高倍镜的用法 用高倍镜的方法须在低倍镜取像的情况下，换高倍镜头，调节微调旋钮直至看清物象。调节范围在一圈以内。 显微镜的维护 ①取镜时应一手紧握镜臂，一手平托镜座。安放好的显微镜就不要随意搬动。 ②使用前后，检查镜头和镜体，严禁随意拆卸。 ③保持清洁，避免灰尘和潮湿。避免阳光直射。远离挥发性和腐蚀性化学试剂。 ④镜筒下降时，眼睛一定要看着物镜。 ⑤使用显微镜时，一定要稳重、谨慎、轻拿轻放。显微镜不要放在实验桌的边缘，以防跌落地面。 ⑥实验完毕，把显微镜擦拭干净。再转动镜头转换器，把两个物镜偏到两旁。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处保存。 2.2 用具 2.2.1 放大镜、刀片、解剖刀、镊子(包括粗镊及眼科弯镊与直镊)、剪(眼科剪与手术剪)、解剖针。 2.2.2 载玻片、盖玻片。 2.2.3 吸湿器(即玻璃干燥器改装蒸馏水加微量苯酚，潮气润湿药材样品用)、培养皿或小烧杯(放切片用，切片后的处理均可在其中进行)、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒(粗与细)、乳钵、量筒。 2.2.4 毛笔(从刀上刷取切片用)、铅笔(HB、4H、6H绘图用)、带盖搪瓷盘(装切片标本用)、纱布、吸水纸(滤纸)、火柴等。 3 试液 3.1 水合氯醛试液 取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。 此液为透化剂，可使干缩的细胞壁膨胀而透明，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质及挥发油等。 3.2 甘油醋酸试液(斯氏液) 取甘油、冰醋酸与水各等份，混合即得。 此液专用于观察淀粉形态，可使淀粉粒不膨胀变形，便于测量其大小。 3.3 甘