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干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响
摘要:以小麦幼苗为试验材料,研究干旱胁迫对小麦生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(ASA)的含量的影响。试验结果表明:在干旱胁迫下除发芽率下降外,小麦幼苗的脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)的含量都比正常情况下小麦幼苗的含量多。
关键词:干旱胁迫 小麦幼苗 生理生化指标
引言:植物体生存在自然环境中,其水热条件随时都变化,对植物多少会产生一些影响。凡是对植物产生伤害的环境都被称为逆境,也称胁迫。干旱也属于逆境,水分在植物的生命活动中占主导地位。大多数植物遭受干旱逆境后各个生理过程都会受到不同程度的影响。如生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)等发生变化。小麦的生长不仅受到自身遗传物质的控制,还受到众多环境因子的影响,如光、温、水和土壤营养物质等。世界上约有70%的小麦播种面积分布在干 旱、半干旱农业区,干旱对小麦的生理、生化都产生重要的影响,进而影响小麦的生长发育、产量和品质。因此,为了减小环境对小麦生产的影响,有必要从小麦的各项生理生化指标含量的变化,来研究干旱胁迫对小麦的影响。本次实验是研究吸胀12小时萌发一周后,干旱处理一周的小麦其生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(ASA)含量的变化。
一、材料与方法
1、材料及处理
将吸胀12小时的小麦种子在有6层湿润滤纸的带盖白磁盘(24cmX16cm)培养基中生长7天,7天后将其中一部分幼苗干旱生长7天,7天后用相同的方法分别对实验组和对照组的小麦进行脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(ASA)的含量的测定。
2、测定方法[1]
(1)小麦种子发芽率的测定
各取50粒吸胀的小麦种子→沿胚的中心线切成两半(严格区分两个半粒),进行下列实验:其中50个半粒进行TTC染色(30℃水浴 20 min) ,另50个半粒进行曙红染色(室温染色10 min) 根据两种方法的染色情况,分别计算发芽率。
(2)脯氨酸(Pro)含量的测定
①脯氨酸(Pro)的提取:分别取0.1g实验组和对照组的胚芽鞘→加入3 mL 3%磺基水杨酸(SSA)和少许石英砂→充分研磨→用2 mL 3% SSA洗研钵→5000 rpm离心10 min →上清液定容至5 mL。
②脯氨酸(Pro)的测定:上清液各2 mL →分别加入2 mL冰乙酸和2 mL茚三酮试剂→煮沸15 min→冷却后→5000 rpm离心10 min(若没沉淀可略此步骤) →分别测定A520,
将测得的结果用公式
Pro content = 计算出正常和干旱生长小麦的胚芽鞘的脯氨酸含量。
(3) 丙二醛(MDA)含量的测定
①丙二醛(MDA)的提取:分别取0.1 g实验组和对照组→加入3 mL 10%TCA和少许石英砂→充分研磨→用2 mL 10%TCA洗研钵→5000 rpm离心10 min →上清液定容至5 mL。
②丙二醛(MDA)的测定:分别取上清液各2 mL →加入0.6%TBA(用10% TCA配制) 2 mL→煮沸12 min→冷却后→5000 rpm离心5 min →分别测定OD450和OD532
将测得的OD450和OD532的数据带入下列公式
OD450=C1x 85.4
OD532 = C1 x 7.4+C2X155000
C1:可溶性糖的浓度,C2:MDA的浓度
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