血浆单个核细胞分离液粒细胞器材.PPT

（6）存贮方案SAVE AS 文件名。 （7） 运行待测标本，调整以下仪器参数： PMT(光电倍增管)、电压(Volts) 增益(Gain)、检测速度(Flow Rate) 阈值(Discriminator) 颜色补偿(Color Compensation) （8）重新存储方案，将原方案覆盖。 （1）选择预先存储的方案。 （2）仪器提示 Insert Sample Tube。 （3）将阴性对照的样本管放入样本台上，仪器会自 动检测样本管并进行数据采集。 3.标本测定 （4）电压的调整 用鼠标左键点击FASTSET，出现十字标记后，将鼠标移至所需调整的细胞群，按住左键进行调整，松开左键后,仪器会自动重新进行数据采集，相应的电压及增益值会随之改变。 （5）样本测试 与上述相同条件下，上样品管进行样本测试。若为双色以上分析，注意调整颜色补偿。 （6）调整颜色补偿： 用鼠标点击FAST COMP 将鼠标移置所需补偿的细胞群，拖至正常位置。 用计算机工作软件将串入相邻荧光通道的信号加以扣除，自动校正荧光染料光谱之间叠加所造成的误差。 （1）选择已储存的文件。 （2）将文件及图形打开。 （3）在原有参数的基础上重新建立直方图，设立 直方图打印方式。 4. 结果分析 质量控制 仪器设备 样本处理 试剂 操作过程 数据分析 主要包括：流路和光路的稳定性 荧光颜色补偿 光电倍增管转换的线性和稳定性 1.仪器的校准 （1）光路与流路校准 可使用标准荧光微球（Flow Check ）对仪器的光路与样 品流进行校准验证，将变异 系数调整到最小范围。 ① 将Flow Check在室温下放10min。 ② 选择检测Flow Check的ROTOCOL。 ③ 取0.5ml(15～20滴)Flow Check放入试管中。 ④ 将试管放在样品台上进样检测，取数5000(FS) 。 ⑤ 记录FS 及荧光FL1～FL4 的HPCV值，核对是否2%，是否与以前记录相符。 （2）光电倍增管校准 多用质控品进行光电倍增管校准，以保证FCM在分析过程中处于最佳状态。 ① 选择Flow-Set Protocol。 ② 取0.5ml (15～20 滴)Flow-Set，放入试管中，进样。 ③ 取数10000，检查 Mean(PEAK)Channel 与所设定的 Flow-Set 的参考值是否相符合。 ④ 若不符，则需调整HV，使Flow-Set 的Mean(Peak))Channel 与设定值相符。 （1）同型对照 选用相同源性的未标记单抗CYTOTROL作为阴性对照。 （2）全程质控 样品标记、溶血、洗涤、仪器质量控制和上机检测的过程都会直接影响检测结果。 一般采用标准质控样品IMMUNOTROL来进行全程质控。 2.实验操作过程的质控 设备维护 在完成样品测试，清洗真空管路之前进行。 （1）将漂白水与双蒸水1:1 稀释，吸3ml加入一支试管内。 （2）准备3ml双蒸水放入试管内。 （3）在 ACQUISITION状态栏下选择 PANEL-Cleaning Panel。 （4）按照提示，分别将装有稀释的漂白液和双蒸水的试管依次放入样本台。 （5）上机执行清洗程序。 1.日常清洗程序 在每一批样品测试后，关机前进行。 （1）按Cytometer 主机上的RUN键，使其处于闪烁状态。 （2）将真空管洗器内加满双蒸水，放在样本台上，如此反复3次。 （3）按下 Cytometer 主机的 CLEANSE 键，进行清洗循 环，结束后整个管道内充满清洁液。 2.真空管清洗程序 （1）完成日常清洗程序。 （2）完成真空管清洗。 （3）清洁样本台和样本针探头。 （4）将装有2ml双蒸水的试管放在样本台上。 （5）退出SYSTEMⅡ软件。 （6）依次关闭显示屏、计算机、打印机、总电源开关。 3.关机程序 在操作中较常出现的故障为喷嘴堵塞。排除故障的步骤： （1）放开托臂，用10%的次氯酸钠反复冲洗再放回托臂机，如果故障还未排除就应关掉主机。 （2）用注射器接上胶管套，在喷嘴上反复抽吸，一般堵塞现象可以排除。 4. 常见故障及排除 白血病AML-M0的骨髓细胞CD抗原检测结果 结果判定 见习报告 1. 结合见习流式细胞分析系统，简述流式细胞仪的基本结构和工作原理。 2．结合见习流式细胞分析系统，简述流式细胞仪的技术流程。 3