纺锤链霉菌说sd-07与突变株所产抗生素特性比较及其胞外多糖的初步研究.docxVIP

原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进 行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何 其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡 献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人 承担。 论文作者签名： 瑟幽 日 w肌s、≥i 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅 和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关 数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本 学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：j虬导师签名缢日 期：卫版兰：髟’ 万方数据 目录摘要 目录 摘要 I Abstract．．．．．．．．． ． ． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．． ．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．． ．．．． ．．．．．． ．．III 第一章前言 1 1．1研究背景及意义 ．．1 1．2多烯大环内酯类抗生素 ．．2 1．2．1作用机理 ．3 1．2．2抗生素制备 ．4 1．2．2．1结晶法 5 1．2．2．2色谱法 5 1．2．2．3溶剂萃取法 6 1-2．2．4离子交换法 7 1．2．2．5吸附法 7 1．3微生物胞外多糖 ．．7 1．3．1微生物胞外多糖的应用 7 1．3．1．1药学领域 ．．8 1．3．1．2农业 ．8 1．3．1．3食品领域 一9 1．3．1．4石油、化工 ．．9 1．3．2多糖的结构解析方法 9 1．3．2．1酸水解 10 1．3．2．2色谱法 10 1．3．2．3甲基化 10 1．3．2．4红外光谱 11 1．3．2．5核磁共振(NMR) ．．11 1．3．3胞外多糖产生的影响因素 ．11 1．3．4 SD一07胞外多糖与接合转移之间的关系 ．．12 1．4本论文主要内容及研究价值 13 第二章 纺锤链霉菌SD一07及其突变株所产抗生素特性比较 ．1 5 2．1实验材料 ．1 5 2．1．1菌种 15 2．1．2培养基 1 5 2．1．3实验仪器 1 7 2．1．4试剂 1 7 2．2实验方法 ．1 8 2．2．1三种抗生素的提取与回收率 ．18 2．2．2三种抗生素的中压液相分析 ．18 2．2．3三种抗生素的组分分析 ．1 8 2．2．3．1 HPLC分析三种抗生素 ．1 8 2．2．3．2质谱分析三种抗生素 19 万方数据 2．2．4三种抗生素的抑菌活性 2．2．4三种抗生素的抑菌活性 ．19 2．2．5三种制备方法制备抗生素 ．20 2．2．5．1中压液相制备抗生素 20 2．2．5．2 Sephadex LH．20制备抗生素 20 2．2．5．3正丁醇萃取制备抗生素 20 2．2．6三种方法所制备抗生素对人体内两种致病真菌的抑制作用 ．．20 2．2．7三种方法所制备抗生素的细胞毒性比较 21 2．2．8三种方法所制备抗生素的致突变性比较 ．．21 2．2．9菌种筛选与保存 ．．22 2．3结果与讨论 ．23 2．3．1三种抗生素的提取与得率 ．23 2．3．2三种抗生素的中压液相分析 ．24 2．3．3三种抗生素的组分分析 ．25 2．3．3．1三种抗生素的高效液相分析 25 2．3．3．2三种抗生素的质谱分析 28 2．3．4三种抗生素的抑菌活性结果比较 ．29 2．3．5三种方法所制备抗生素 ．29 2．3．5．1 MPLC制备抗生素 ．30 2．3．5．2 Sephadex LH．20制备抗生素 30 2．3．5．3正丁醇萃取制备抗生素 3 1 2．3．6三种方法所制备抗生素对人体内两种致病真菌的抑制作用 ．．32 2．3．7三种方法所制备抗生素的细胞毒性比较 34 2．3．8三种方法所制备抗生素的致突变性比较 ．36 2．3．9菌种的筛选与保存 38 2．4本章总结 ．39 第三章纺锤链霉菌SD．07所产胞外多糖的特性研究及结构解析 ．41 3．1实验材料 ．41 3．1．1菌种 41 3．1．2培养基 41 3．1．3实验仪器 44 3．1．4试剂与凝胶 44 3．2实验方法 ．45 3．2．1苯酚．硫酸法f741钡,U定胞外多糖含量 45 3．2．2筛选多糖发酵时间 ．．46 3．2．3不同阳离子对多糖产量的影响 ．46 3．2．4筛选多糖发酵用培养基 ．46 325上清与菌体中多糖含量对比 ．47 3．2．6提取后表面多糖的除杂和分离纯化 47 3．2．7纯化后多糖分子量