2019版高考生物总复习 第十七章 生物技术在其他方面的应用.ppt

第十七章　生物技术在其他方面的应用 考点44 DNA、血红蛋白的提取 考点45 植物有效成分的提取 考点44 DNA、血红蛋白的提取 高考考法突破 考法1 有关DNA和蛋白质的提取和分离 应试基础必备 应试基础必备 DNA和蛋白质分离提取的比较 （1）DNA提取实验操作分析 ① 4次过滤的比较 高考考法突破 考法1 有关DNA和蛋白质的提取和分离 1.DNA的粗提取和鉴定 ②2次加蒸馏水的作用 a.加入鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破； b.加入含DNA的2mol/L NaCl溶液中，使其稀释，从而析出DNA。 ③3次使用纱布的作用 a.过滤血细胞破裂液，提取细胞核物质(DNA在滤液中)； b.过滤0.14mol/L NaCl溶液，滤出DNA(DNA在黏稠物中)； c.过滤溶有DNA的2mol/L NaCl溶液(DNA在滤液中)。 ④3次使用 NaCl溶液的作用 a.2mol/L NaCl溶液，溶解DNA，去除不溶于该溶液的杂质； b.0.14mol/L NaCl溶液，使DNA析出； c.2mol/L NaCl溶液，溶解滤出的DNA黏稠物。 （2）DNA的鉴定：DNA在沸水浴条件下，遇二苯胺会变蓝色。 （1）常用的蛋白质分离方法 ①凝胶色谱法（根据香港对分子质量大小分离蛋白质） 【注意】a.凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。 b.加快干凝胶膨胀的方法：可将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾，通常只需1～2 h。这种方法不但节约时间，而且可以除去凝胶中可能带有的微生物，排出胶粒内的空气。 2.血红蛋白的提取和分离方法 ②电泳法（带电粒子在电场作用下发生迁移） a.在一定pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 b.由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。判断纯化的蛋白质是否达到要求使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。 （2）蛋白质提取过程中需注意的问题 ①红细胞的洗涤与离心要求：红细胞洗涤过程中，洗涤三次后，上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则无法除去血浆蛋白；离心时转速要低，时间要短，否则白细胞等会一同沉淀，达不到分离效果。 ②蒸馏水和甲苯的作用：血红蛋白释放过程中，蒸馏水的作用是涨破红细胞，甲苯的作用主要是溶解细胞膜。 ［江苏生物2015·25，3分］图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是（多选） ） A.图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同 B.图1中完成过滤之后保留滤液 C.图2中完成过滤之后弃去滤液 D.在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质 例 【解析】图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放其中的核物质，图2中加入蒸馏水的目的是降低NaCl的浓度，使DNA的溶解度降低析出，A错误；由于DNA溶于水，所以图1中完成过滤后DNA存在于滤液中，需保留滤液，B正确；图2中DNA析出，则过滤后弃去滤液，保留黏稠物，C正确；在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉，其中的木瓜蛋白酶能够分解DNA中的杂质蛋白，有利于去除杂质，D正确。 【答案】BCD 考点45 生物材料中有效成分的提取 高考考法突破 应试基础必备 考法4 胡萝卜素的提取 考法3 结合实例考查植物芳香油的提取 (1)植物芳香油的来源和特点 ①来源：天然香料主要来源是动物和植物。动物香料主要来源于麝、灵猫、海狸和抹香鲸等，植物香料来源广泛，可以从50多个科的植物中提取。提取的植物芳香油具有很强的挥发性，组成也较复杂，主要包括萜类化合物及其衍生物。 ②特点：植物芳香油挥发性强，易溶于有机溶剂。 1.植物芳香油的提取 (2)植物芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法和萃取法等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。 应试基础必备 (3)实验设计 ①玫瑰精油的提取 a.玫瑰精油的化学性质：化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。 b.实验流程：鲜玫瑰花+水→水蒸气蒸馏→油水混合物（加入NaCl）→分离油层（加入无水Na2SO4）→除水（过滤）→玫瑰油。 c.分析：加入NaCl的作用是增加水层密度，使油和水分层。加入Na2SO4的作用是吸收油层中的水分，纯化玫瑰精油；用过滤的方法除去玫瑰精油中的固体Na2SO4 。 ②橘皮精油的提取（一般采用压榨法） a.橘皮精油的主要成分是柠檬烯，主要贮藏在橘皮部分。 b.实验流程：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再