荧光偏振免疫测定 (fluorescence polarization immunoassay,FPIA),为一种均相荧光免疫测定方法,其利用荧光物质在溶液中被单一平面的偏振光照射后,可吸收光能而产生另一单一平面的偏振发射荧光,该荧光强度与荧光 标记物质在溶液中旋转的速度呈反比,与分子大小呈正比,常采用抗原-抗体竞争反应原理,适用于小分子半抗原(如药物浓度)的检测。 ? 二、荧光偏振免疫分析仪 基本原理 抗原抗体竞争反应 AgF分子小,转动速度快,偏振荧光弱 AgF-Ab分子大,转动速度慢,偏振荧光强 若待检抗原多,则AgF-Ab少,AgF多,偏振荧光弱 待检抗原含量与偏振荧光强度成反比 偏振光和偏振荧光发生示意图 荧光偏振免疫测定工作原理示意图 1. 抗原抗体反应 2.偏振荧光强度测定 (二) 仪器测定技术要点 1.FPIA的结果好坏取决于荧光素标记的好坏、激发态荧光的平均寿命、抗原的相对分子量和复合物的特性等因素。 2.为提高FPIA灵敏度,可用除蛋白剂对标本进行预处理,除去干扰成分。 (三)注意事项 自动化荧光免疫分析的应用 1. 激素:甲状腺激素、甾体类激素 2. 病毒性肝炎标志物 3. 肿瘤相关抗原 4. 小分子药物 5. 多肽类 第四节 自动化酶联免疫分析系统 根据全自动酶联免疫分析系统的处理模式,人们通
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