四种转染试剂对H9C2细胞转染效率的比较-华西医学.PDF

• 1024 • West China Medical Journal, Jul. 2017, Vol. 32, No. 7   ·论 著· 四种转染试剂对 H9C2 细胞转染效率的比较 1 1 1, 2 倪银芸 ，丁雨 ，吴思思 1. 四川大学华西医院公共实验技术中心（成都  610041 ） 2. 四川大学生物治疗国家重点实验室（成都  610041 ） 【摘要】   目的     比较 4 种不同转染试剂对大鼠心肌细胞 H9C2 细胞的转染效率，以选择最优转染方法。 方法     以带有增强绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein ，EGFP ）基因的质粒作为外源基因，分别用 4 种不同转染试剂 FuGENE HD、DNA-In CRISPR、Lipofectamine 3000 和 Lipofectamine 2000 转染 H9C2 细胞，通过 荧光显微镜观察和荧光酶标仪检测荧光强度来评价转染效率，并通过 Cell Counting Kit-8 （CCK-8 ）试剂盒检测 4 种转染试剂对细胞活性的影响。结果    Lipofectamine 3000 转染效率最高（50%）；而 DNA-In CRISPR 转染效率 最低（1%）。4 种转染试剂中 Lipofectamine 3000 对细胞毒性也最低，转染 48 h 后细胞活性为 94.55% 。结论    转染试 剂 Lipofectamine 3000 在保证相对较高的转染效率的同时也具有最低的细胞毒性，更适合用于 H9C2 细胞的转染。 【关键词】   转染；大鼠心肌细胞 H9C2 ；FuGENE HD ；DNA-In CRISPR ；Lipofectamine 3000 ； Lipofectamine 2000 Comparison of four different transfection reagents for transfection efficiency of H9C2 cells 1 1 1, 2 NI Yinyun , DING Yu , WU Sisi 1. Core Facility, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu, Sichuan 610041, P. R. China 2. The State Key Laboratory of Biotherapy, Sichuan University, Chengdu, Sichuan 610041, P. R. China Corresponding author: WU Sisi, Email: wusisi1981@scu.edu.cn 【Abstract 】 Objective    To compare four different transfection reagents for transfection efficiency of rat heart myoblast cells H9C2, in order to choose the optimal transfection method. Methods    The plasmids of enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene were transfected as exogenous genes to H9C2 cells from four different transfection regents including FuGENE HD, DNA-In CRISPR, Lipofectamine 3000 and Lipofectamine 2000. Fluorescence intensity was measured by fluorescence microscopy and fluorescence microplate reader to evaluate transfection efficiency. The effects of fo