植物染色体组型分析1.pptVIP

实验五 植物染色体组型分析 一、实验目的 掌握染色体组型分析的各种数据指标 掌握植物染色体核型分析的标准和方法。 ? 二、实验原理 ◆核型或染色体组型分析 (karyotype analysis) 是染色体研究中对染色体的各种特征进行定量和定性表述的一种基本方法, 表述的内容主要有: 染色体数目和染色体形态 , 包括染色基数、B-染色体,性染色体,染色体绝对长度, 相对长度值, 着丝粒, 次缢痕以及随体数目和着丝粒位置等特征。 这些对研究植物系统演化, 物种之间的亲缘关系、起源、进化与分类, 远缘杂交及遗传工程中的染色体鉴别都有重要意义。 ◆核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。 三、实验材料 1.供核型分析的细胞必须具备下列标准 : ■染色体处于细胞分裂中期 ■染色体数目齐全 , 而且分散良好 , 没有重叠 ■各染色体铺展平整, 染色体各组成部分显示清楚, 着色均匀。 2.实验用品 ■毫米尺、剪刀、胶水、计算器 ■染色体放大照片 四 .实验方法 ◆染色体数目确定 ◆染色体形态特征： 长度：绝对、相对 相对长度=每条染色体的长度/全套染色体长度 臂比=长臂/短臂 着丝点指数=短臂/（长+短臂） 随体的有无 分组排队原则 ■着丝粒类型相同，相对长度相近的分一组 ■同一组的按染色体长短顺序配对排列 ■各指数相同的染色体配为一对 ■可根据随体的有无进行配对 ■将染色体按长 → 短排队，短臂向上 五.实验步骤 1 计数: 沿边缘剪下染色体,编号 2 测量：(有随体的染色体在表内以星号“*”标记） 表1 核型分析参数表（草表） 3. 配对:根据所测数据结合目测，按次缢痕的有无和位置、随体的形态和大小、臂比值、染色体长度和形态相似将同源染色体配对； 4 .排列: 染色体长的在前，等长的染色体以短臂长的在前； 5 .剪贴 : 着丝粒处于同一水平线上，短臂在上，长臂在下； 6 .计算 每对同源染色体绝对长度 每对同源染色体相对长度= × 100% 染色体总长度 e 染色体长臂 臂比 = 染色体短臂 最长染色体长度 染色体长度比= 最短染色体长度 翠菊的核型分析 着丝粒位置 : 以上述臂比值确定。 臂比值 着丝粒位置 简写 1.00 正中部着丝粒 (median point) M 1.01-1.70 中部着丝粒 (median point) m 1.71-3.00 近中部着丝粒 (submedian region ) sm 3.01-7.00 近端部着丝粒 (subterIIlialregion ) st 7.01 以上 端部着丝粒 (terminal point) t ∞ 顶端着丝粒 (terminal point) T 7. 表格 : 核型分析中各项测量的平均数值应列表 , 列表内容力求简明和实用 , 其格式项目如下 : 表 2 染色体相对长度、臂比和类型 序号 相对长度 % 着丝粒指数 臂比 类型 (短臂+长臂=总长度) 1 2 3 4 5 6 ┇ ( 注 ) 列表时在具随体染色体的顺序号上标上“*”号。 8. 绘制核型模式图 (idiogram): 以表2中所列各染色体的相对长度平均值绘制。 9. 核型公式 : 即综合核型分析的结果 , 将一种生物核型书写成一公式, 它简明扼要 , 便于记忆和比较 , 如玉米核型为 :2n = 20=12m+6sm + 2m(SAT) 。 SAT 代表具随体染色体。 10. 核型分类 : 表 4.2 按对称到不对称的核型分类 臂比大于2:1的染色体