实验6-胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响课件.ppt

实验2324 胰岛素和肾上腺素 对家兔血糖浓度的影响 精品文档 掌握血糖(blood sugar)的测定方法及 激素(hormone)对血糖浓度的影响。 了解血糖测定的临床意义。 实验目的与要求 精品文档 机体的血糖水平受多种激素的调节而维持稳定 影响血糖的激素分为两类： 降低血糖的激素：胰岛素(insulin) 升高血糖的激素：肾上腺素(adrenaline)、胰升糖素、 糖皮质激素和生长激素 血浆(plasma)：全血经抗凝处理后得到的液体成分， 含有凝血因子、纤维蛋白原等 血清(serum)：全血凝固后析出的液体， 不含纤维蛋白原 血 样 实 验 原 理 精品文档 620 nm测定待测血样的吸光度(A) 与同样处理的葡萄糖标准溶液比较(标准管法) 即可求得血样中葡萄糖的含量。 酸性、加热 -3 H2O 羟甲基糠醛 邻甲苯胺 醛亚胺（蓝色） 葡萄糖 (glucose) 邻甲苯胺法测定血糖浓度 精品文档 2、血样的采集 1）心脏内取血5ml，加入抗凝剂（草酸钠）【胰-1、肾-1】 2）皮下注射 胰岛素0.5ml/kg（2U/kg），1小时后 1%肾上腺素0.4ml/kg，半小时后 3）心脏内取血5ml，加入抗凝剂【胰-2、肾-2】 1、动物的准备 家兔两只，禁食一晚。标记后，测量体重并记录。 实 验 步 骤 精品文档 4、邻甲苯胺法测定血糖浓度 1）取大试管，按Page78表格添加试剂 2）混匀各管，沸水浴中加热10min后取出，流水冷却。 3）用空白管校正吸光度零点，读取各管620nm的吸光度。 3、血浆的制备 血样采集后，2000rpm离心5min，取上清。 精品文档 数据 空白 对照 注射激素前 注射激素后 胰岛素组 胰-1 胰-2 肾上腺组 肾-1 肾-2 精品文档 G胰-1 ＞ G胰-2 G肾-1 ＜ G肾-2 A测定：m胰-1、m胰-2、m肾-1、m肾-2 实 验 结 果 A测定 ——— × m标准 A标准 血糖浓度 = ————————— × 1000 V测定 × 180 g/mol 精品文档 1、邻甲苯胺试剂中含冰乙酸，谨防腐蚀分光光度计 2、分光光度计的使用方法 3、微量移液器的使用 4、离心机使用前必须配平：质量配平位置配平 5、电磁炉使用前10min打开；绝对不可干煮； 加热完成后，用夹子取出试管，绝对不可用手拿 6、兔子的抓取、固定、心脏采血、皮下注射方法 注 意 事 项 精品文档 1、打开电源，调节旋钮至需要的波长，预热20~30min 2、1档（空白管），T模式下调100%，显示“Blank”、“100” 3、拉杆拉至1.5档，T模式下调0%，显示“0.00” 4、换到A模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度 拉杆，0-4档 样品池 读数 波长 毛面 光面 1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光线从光面通过 2、用溶液润洗2-3次，装至2/3至4/5体积 3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面 比色杯 分光光度计的使用 精品文档 血糖升高 1、糖尿病 2、内分泌疾病：甲亢、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤、 胰高血糖素瘤 3、妊娠高血糖 4、胰腺疾病：坏死性胰腺炎、胰腺手术、原发胰腺癌 5、应激性高血糖 血糖降低 1、胰岛?细胞瘤或增生 2、内分泌疾病：垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减低 3、肝源性低血糖，各种肝病致肝功能衰竭 血糖测定的临床意义 精品文档