南京陆慧媛实际操作.ppt

（一）、实验动物给药 （二） 、实验动物生物标本采集 （三）、实验动物的麻醉 （四）、实验动物的安死术 （五）、实验动物病理解剖和标本留取 二、动物实验的给药和处置 （一） 、实验动物的给药 经口（胃肠道）给药：常见有喂饲、灌胃和吞咽胶囊等方式； 注射给药：分为皮下、皮内、腹腔、静脉注射、肌肉注射等； 经呼吸道给药：可分为吸入染毒和气管内注入； 经皮给药：分为经皮染毒和皮肤刺激与致敏试验。 灌胃： 注意事项： 1、适用于大鼠、小鼠、兔、犬等动物； 2、单次或一天内多次染毒灌胃前应禁食空腹，大鼠隔夜禁食，小鼠禁食4小时，灌胃2~4小时后提供饲料； 3、多次染毒一般不禁食，但应每日定时染毒； 4、剂量准确，但有伤及食管和误入气管可能。 （一） 、实验动物的给药 （一） 、实验动物的给药 注射给药： 1、皮下注射 2、尾静脉注射 3、腹腔注射 （二） 、实验动物生物标本采集 血液采集：终末和非终末采血； 小鼠、大鼠采血部位及采血量 尿液采集： 粪便采集： 胆汁采集： （三） 、实验动物的麻醉 常用麻醉剂的用法及剂量 （四） 、实验动物的安死术 常用实验动物适用的安死术方法 （五） 、实验动物病理解剖和标本留取 谢谢！ 一、细胞： 1.性状是否稳定细胞复苏后，须经3～4次传代达到稳定； 2.是否处于指数生长期指数/对数生长期细胞活力高，接种易成瘤，而且保证无污染 3.细胞是否有损伤 尽量缩短细胞收取时间，减少细胞损伤。收取后重悬于不含血清的培养液或PBS中，放于冰盒中备用。 4. 细胞浓度是否合适 细胞浓度应达到1×106~ 5×107，注射量为0.1mL~0.2mL。  肿瘤细胞接种免疫缺陷小鼠影响成瘤率的可能因素 二、动物 裸鼠周龄是否合适裸鼠细胞免疫缺陷，但仍有部分体液免疫力。一般裸鼠3～4周龄免疫力低，易成瘤。 三、肿瘤的特殊要求目标肿瘤对内环境要求，如人源肿瘤，需要模拟生理激素水平。接种乳腺癌细胞，可选择了雌性动物，以模拟雌激素环境，提高成瘤率。 实验动物基本操作技术 陆慧媛 luhy@jsciq.gov.cn 一、实验动物的准备和操作 二、实验动物的给药和处置 （一）、动物实验前的准备 （二） 、实验动物的抓取和保定 （三）、实验动物的标识和识别 一、动物实验的准备和操作 （一）、动物实验前的准备 动物购入后，雌、雄分开饲养，一般应进行5~7天检疫，对动物进行观察。动物外观健康检查主要内容： 头部 姿势端正 神经系统 震颤不全性麻痹 眼 瞳孔清晰、分泌物、眼睑炎症 耳 耳道分泌物、耳壳脓疮 鼻 打喷嚏、浆性粘液分泌物流出 皮肤 毛色光洁、创伤、脓疮、疥癣、湿疹 胃肠道 呕吐、腹泻、肛门口毛洁净 （二） 、实验动物的抓取和保定 小鼠的抓取和保定： 1、用右手提起尾部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉，此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙面，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并用小指和手掌尺侧夹持其尾根部固定手中； 2、用左手拇指和食指抓住小鼠尾部，再用手掌尺侧及小指夹住尾根，然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤，将小鼠提起。 大鼠的抓取和保定 1、戴上防护手套，抓住大鼠的尾中部或根部从笼具中取出后立即置于笼盖或实验台上。 2、右手抓住大鼠尾根部，将大鼠置于笼盖或其它粗糙表面上，轻轻向后拉尾。 3、当大鼠向前爬行时，用左手食指和中指夹住大鼠颈部，同时拇指和无名指滑向其左右腋下，分开前肢，拿起动物反转为仰卧位，即可进行实验操作。 （二） 、实验动物的抓取和保定 （三） 、实验动物的标识和识别 1、颜料标记 颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有 5%苦味酸溶液 (黄色) 2%硝酸银溶液 (咖啡色) 0.5%中性品红溶液 (红色) 煤焦油的酒精溶液(黑色)。 编号原则：先左后右，从上而下。 清晰、耐久、简便、适用 小鼠和大鼠标号示图 （三） 、实验动物的标识和识别 2、烙印：兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。 3、纹身：用刺数钳在局部皮肤(兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤)刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。 4、号牌：将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。 5、打孔：用打孔器在兔耳上打孔或剪口。