基础化学 教学课件 ppt 作者 吴华 董宪武 主编 刘强 副主编 上官少平 主审第十章分光光度法.ppt

* * 第十章 吸光光度法 本章教学目标： ★ 掌握物质颜色与光的吸收关系。 ★ 掌握光的吸收定律。 ★ 了解比色法和分光光度法。 ★ 掌握吸光光度法的应用。 第一节 光的性质及物质对光的吸收定律 一、吸光光度法的特点 （1）灵敏度高 （2）准确度较高 （3）操作简单、分析速度快 （4）应用广泛 第十章 吸光光度法 光是电磁波，具有波动性和粒子性。 肉眼可感觉到的光，我们称为可见光。可见光只是电磁波中一个很小的波段，其波长范围为400～800 nm。具有同一波长的光称为单色光，每种颜色的单色光都具有一定的波长范围，通常把由不同波长的光组成的光称为复合光。让一束白光通过棱镜，由于折射作用可分为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫七种色光，这种现象称为色散，白光即为复合光。 二、光的性质 第十章 吸光光度法 实验证明不仅上面所说的七种颜色的光可以混合成白光，如果将适当颜色的两种单色光按一定的强度比例混合，也可以形成白光，这两种单色光被称为互补光，所显的颜色称为互补色。图中处于直线关系的两种单色光为互补色光，如绿光和紫光为互补色光，蓝色和黄色为互补色等。 第十章 吸光光度法 互补色示意图 第十章 吸光光度法 三、光的选择性吸收及溶液的呈色 1．光的选择性吸收及溶液的呈色 不同物质对各种波长光的吸收具有选择性。当白光通过某溶液时，某些波长的光被溶液吸收，而另一些波长的光则透过，溶液的颜色由透射光的波长决定。透射光与吸收光称为互补色光，两种颜色称为互补色。 第十章 吸光光度法 物质颜色与吸收光颜色的互补关系 为了更准确地表示有色溶液对不同波长的光的吸收程度，将不同波长的单色光依次通过某浓度一定的有色溶液，测出相应波长下物质对光的吸收程度（吸光度A），然后以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标作图即为A–λ吸收曲线。 第十章 吸光光度法 2．光吸收曲线 KMnO4溶液的吸收 朗伯（Lamben）和比尔（Beer）分别于1760年和1852年提出物质对光的吸收程度与液层厚度及溶液的浓度之间的定量关系，二者结合称为朗伯－比尔定律，也叫光吸收定律。 当一束平行单色光照射到任何均匀的，非散射的介质（固体、液体、或气体）时，光的一部分被吸收，一部分透过溶液，一部分被反射。 第十章 吸光光度法 四、光的吸收定律 假设入射光强度为I0，透过光强度为It，吸收光强度为Ia，反射光的强度为Ir，由于采用同质同型的比色皿，反射光强度一致，其影响可以在测定时相互抵消，它们之间的关系为： I0 = Ia + It 第十章 吸光光度法 经实验表明它们之间有下列关系： 光吸收示意图 lg 值越大，说明光被吸收得愈多，故通常把lg称为吸光度，用A表示。则有： 第十章 吸光光度法 I0 It 即为朗伯－比尔定律的数学表达式。它表明：在一定温度下，当一束平行的单色光通过有色溶液时，其吸光度与溶液浓度和厚度的乘积成正比。 透过光的强度It与入射光的强度I0之比称为透光率，常用符号T表示，即： 第十章 吸光光度法 或 由上可见透光率、吸光度与溶液浓度和厚度的关系为： 则溶液浓度和厚度的乘积只与吸光度成正比，而不与透光率成正比。以上两式中的K是比例系数，与入射光的波长、吸光物质的性质和测量的温度等因素有关。K值随c所用的单位不同而不同。当c的单位为g?L-1，b单位为cm时，K用a表示，其单位为g?L-1，a称为吸光系数，则： A = abc 第十章 吸光光度法 摩尔吸光系数ε的物理意义为：在一定温度、波长下，待测物质浓度为1 mol·L-1，液层厚度为1cm时，所具有的吸光度。 第十章 吸光光度法 当c的单位为mol?，b单位为cm时，K用ε表示，其单位为mol?L-1，ε称为摩尔吸光系数，则： A = εbc 摩尔吸光系数ε是有色物质在特定波长下的特征常数，是表征显色反应灵敏度的重要参数，ε值越大，测定的灵敏度也越高，反应越灵敏，可测量组分的浓度越低。一般来说：ε 104显色反应属于低灵敏度；1×104 ε 5×104 属于中等灵敏度；6×104 ε 1 ×105 属于高灵敏度。 第十章 吸光光度法 第十章 吸光光度法 答：ε为1.1 × 104 L·mol?1·cm?1。 解：Fe的摩尔质量为55.85 g·mol?1 【例10–1】 已知Fe2+的质量浓度为500 μg·，用邻二氮菲显色后，用