青霉素类、头孢菌素类.ppt

Contents 第三节 氨基糖苷类 庆大霉素 (gentamycin) 绛红糖胺 (紫素胺) 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 (N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺) 第三节 氨基糖苷类 一、结构与性质 1）碱性（氨基）：临床应用其硫酸盐 2）溶解度（氨基、羟基）：水溶性 3）旋光性（糖）：多个手性碳 4）稳定性（苷）：强酸、碱条件均可水解 二、Identification 第三节 氨基糖苷类 坂口反应 麦芽酚反应 N-甲基葡萄 糖胺反应 第三节 氨基糖苷类 1.茚三酮反应——羟基胺类,α-氨基酸 △ 2. Molisch 试验 ——五碳糖或六碳糖结构 红紫色 羟甲基糠醛 (含六碳糖结构氨基糖苷类酸性水解产物) 第三节 氨基糖苷类 蓝紫色 3. N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应） 乙酰丙酮 OH- 吡咯衍生物 对二甲氨基苯甲醛 H+ 红色 第三节 氨基糖苷类 乙酰丙酮 OH- 对二甲氨基苯甲醛 H+ 第三节 氨基糖苷类 4.麦芽酚反应——链霉糖特有反应 H+ 5.坂口反应——链霉胍特有反应 链霉素 OH- 水解 8-羟基喹啉 NaOBr 或α-萘酚 链霉胍 橙红色 6.硫酸盐反应 7.色谱法 8.光谱法 第三节 氨基糖苷类 三、Purity Test 1.链霉素中链霉素B（甘露糖链霉素）的检查 来源：发酵中产生 方法：TLC中的对照品法 2.硫酸奈替米星中西索米星的检查(TLC) 3.庆大霉素C组分的测定 第三节 氨基糖苷类 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水－冰醋酸－甲醇(25:5:70) 配制的0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液为流动相（必要时调节甲醇的含量）；检测波长为330nm 。理论板数按C2组分峰计算应不低于2000。C2a 峰和C2峰的分离 度应符合要求。 测定法 取本品适量，精密称定，加水制成每1ml 中含0.65mg的溶液，精密量取4.0 ml，置10ml量瓶中，加异丙醇2ml与邻苯二醛试液1.6ml，用异丙醇稀释至刻度，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，冷却，滤过，取续滤液10μl 注入液相色谱仪，记录色谱图； 另取庆大霉素标准品，同法测定。C组分的保留时间依次为：C1、C1a、C2a、C2。量取C1、C1a、C2a、C2的峰面积。 C1应为25％～50％，C1a应为15％～40％，C2a＋C2应为20～50％ 。 第三节 氨基糖苷类 庆大霉素无紫外吸收，需进行衍生化处理后再进行HPLC测定。 λmax = 330nm 讨论 第三节 氨基糖苷类 1、柱效：以C2峰计算，理论板数应不低于2000，在此柱效下各组分之间才能达到规定的分离度。为此色谱柱做适当选择。 2、流动相：流动相极性适当控制(适当调节甲醇的比例)。 极性过强，出峰快，分离不佳。C1峰与衍生试剂等杂质峰难分析;极性过弱，出峰太慢。实验表明，C2峰的保留时间控制在20min～30min较为适宜。 3、衍生化试剂与衍生物的稳定性：配制后不能久置，时间久了试剂峰峰高增加并影响组分测定，一般避光保存可使用三天。生成的衍生物不稳定。 4、离子对试剂浓度影响：离子对试剂浓度对庆大霉素OPA衍生物保留值有影响。 Analysis of antibiotics 第十二章抗生素类药物的分析 药物分析教研室 概 述 1 β-内酰胺类 2 氨基糖苷类 3 四环素类 4 高分子杂质检查 5 第一节 概述 1.抗生素（antibiotics） 在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称 2.分类 β–内酰胺类(青霉素类、头孢菌素类) 氨基糖苷类(链霉素、庆大霉素、依替米星) 四环素类(四环素、金霉素、土霉素) 大环内酯类(红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素) 多烯大环类(制霉菌素、两性霉素B) 多肽类(多黏菌素、放线菌素) 第一节 概述 3.来源 生物合成（发酵） 化学合成或半合成 4.特点 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差 第一节 概述 5.抗生素质量分析——生物学法、物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合,灵敏度高，结果直观，适用范围广；但操作复杂费时，误差大 理化方法：准确度与专属性较高, 且操作简便；但与临床疗效有偏差 第二节 β–内酰胺类 青霉素(苄青霉素) (penicillins) 氨苄西林 阿莫西林 第二节 β–内酰胺类 头孢氨苄 头孢拉定 头孢羟氨苄 头孢噻吩钠 第二节 β–内酰胺类 6-aminopenicillanic acid, 简称6-APA 青霉素类 7-amin