ELISA相关问题及对策修改版.pptVIP

ELISA试验的有关问题 洗涤液 洗涤的目的：除去未结合的免疫反应物；终止抗原抗体的继续结合；除去血清中与反应无关的其它成份和游离的酶结合物；以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。 洗涤液的种类： 蒸馏水 吐温-蒸馏水 吐温-生理盐水 PBS-吐温-蒸馏水 Tris-吐温-蒸馏水 （PH均为7.2或7.4） Tween 20—月桂酸 （液体） Tween 40—棕榈酸 （液体） Tween 60—硬脂酸 （固体） Tween 80—油酸 （液体） 阈值(Cut off值，阴阳界值) 进行大量阴性标本OD值的检测，统计阴性标本的平均值和标准差。 以X+SD为界值，一个标本值小于此界值时，是阴性的可能性为68%。 以X+2SD为界值，一个标本值小于此界值时，是阴性的可能性为95%。 以X+3SD为界值，一个标本值小于此界值时，是阴性的可能性为99%。 为什么阴性标本会略显色而不是完全无色呢？ 由于目前分离、纯化、检测技术等方面的 限制，基因工程抗原和合成多肽都不可能达 到100%纯度，往往含有2-5%的杂蛋白。同时 ELISA反应板的非特异性吸附也不可避免。 ELISA试验方法的相关问题及质量控制 河北医科大学第二医院检验科 李永军 酶联免疫吸附试验 （enzyme linked imm