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外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 【实验目的】 熟悉异丙基-β-D 硫代半乳糖苷（Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，简称IPTG）诱导外源基因在大肠杆菌中表达的原理和方法。 【实验原理】(Q往圣科技3452125268提供12万种免费质粒) 在E.coliBL21(DE3)染色体DNA中插入了T7 RNA聚合酶基因，该基因的上游为Lac启动子，在正常条件下，大肠杆菌Lac操纵子中LacI编码的阻遏蛋白结合在该Lac启动子以及pET-15b 质粒T7启动子的附近LacO上，抑制T7 RNA聚合酶基因的表达，从而抑制了pET-15b 上T7启动子下游外源基因的表达。当培养基中存在 IPTG时，IPTG与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白成为非活性形式，解除了阻遏蛋白对Lac启动子和T7启动子的抑制，T7 RNA聚合酶基因表达，它与T7启动子结合诱导其下游外源基因的转录，转录产生的mRNA经过翻译表达出目的蛋白。(基金论文，你提供实验材料，我免费给你做实验，成果归你享有Q往圣科技3452125268 ) 本实验选用的工程菌为转化了pET-15bcrtE的E.coliBL21(DE3)。pET-15crtE是通过将噬夏孢欧文氏菌（Erwinia uredovora）编码牻牛儿基牻牛儿焦磷酸合成酶的crtE，在Nde I和Xho I位点克隆到pET-15b中而构建