基于抗体多维数据的解析探讨丙型肝炎病毒抗体亲和力在病程中的动力学变化及与HLA多态性的关联-临床检验诊断学专业论文.docx

目 目 录 摘要 l (一)中文摘要 ．1 (二)英文摘要 6 正文 12 全文前言 ． ．．12 第一部丙型肝炎病毒抗体亲和力测定方法的建立 16 (一)前言(一)日U舌 1616 (二)材料和方法 16 1．高、低亲和力血清制备 17 1．1材料 17 1．1．1实验动物 17 1．1．2主要试剂和仪器 17 1．2方法 ．．17 1．2．1兔子血清样本采集 17 1．2．2兔血清anti．HBs的检测 18 1．2．3 anti．HBs亲和力检测(线性法) ．．18 1．2．4统计分析 一19 2．HCV抗体亲和力检测方法建立 19 2．1材料 19 2．1．1标本来源 ．．19 2．1．2实验分组 ．．19 万方数据 2．1-3主要试剂和仪器 2．1-3主要试剂和仪器 ．．20 2．2方法 20 2．2．1 ALT、AST检测方法 20 2．2．2ALB检测方法 ．2l 2．2．3 HCV．RNA定量测定 21 2．2．4 HCV抗体检测方法 24 2．2．5抗体亲和力的检测 ．．25 2．2．6统计学分析 ．．26 (三)结果 26 1。动物实验抗体亲和力的测定。。 ．．26 2．临床病例血清HCV抗体亲和力测定结果 ．．28 3．ALT、AST分组抗体亲和力、物质量、总活性的比 较 ．．28 4．ALT、AST正常组(HCV-RNA阴性和HCV RNA阳 性组间)抗体亲和力、物质量、总活性的比较 ．29 5．HCV-RNA分组抗体亲和力、物质量、总活性的比 较军筻 3030 6．HCV-RNA(+)与抗体亲和力、物质量和总活性的 logistic回归分析 ．31 (四)讨论 3 1 (五)结论 33 (六)参考文献 33 万方数据 第二部分丙型肝炎病毒抗体亲和力测定的临床意义 第二部分丙型肝炎病毒抗体亲和力测定的临床意义 ．36 (一)一IlU言(一) 舌 3636 (二)材料和方法 36 1．材料 ．36 1．1标本来源 ．．36 1．2实验分组 ．．37 1．3主要试剂和仪器 ．．37 2．方法 ．37 2．1 ALB检测方法 ．．37 2．2 HCV-RNA定量测定 37 2．3 HCV抗体检测方法 ．37 2．4抗体亲和力的检测 37 2．5中和实验 37 2．6统计学分析 ．．38 (三)结果 38 1．328例患者临床一般情况分析 38 2．ALBHCV-RNA分组抗体亲和力、物质量、总活性 的比较 ． ．．39 3．抗体亲和力等的ROC曲线分析 ．40 4．ALBHCV-RNA分组中高亲和力比例分析 ．．40 5．中和实验结果 41 (四)讨论 42 万方数据 (五)结论 (五)结论 44 (六)参考文献 44 第三部分丙型肝炎病毒抗体亲和力与眦A的关系 46 (一)前言 46 (二)材料和方法 ．47 1．材料 ．47 1．1标本来源 ．．47 1．2主要试剂和仪器 ．．47 2．方法 ．48 2．1 ALB检测方法 48 2．2 HCV抗体检测方法 ．．48 2．3抗体亲和力的检测 48 2．4全血DNA提取 48 2．5 DNA浓度测定 ．49 2．6 HLA基因分型 ．．49 2．7统计学分析 51 (三)结果 52 1．104例患者标本HLA．A，．B，．DRBl基因测序结果 ．．52 2．104例丙肝患者标本HLA．A，．B，．DRBl基因频率 ．．54 3．丙肝患者和健康对照组mA基因频率的比较 ．．56 4．两种分析结果的交叉验证 ．．56 5．HLA．A位点、B位点、DRBl位点的平均频率(fA、 万方数据 fB、fDRBl)与抗体亲和力、物质量及总活性的相 fB、fDRBl)与抗体亲和力、物质量及总活性的相 关分析 57 6．不同}玎_一A基因型抗体亲和力的排序 ．．58 (四)讨论 ．．59 (五)结论 ．．62 (六)参考文献 ．．62 第四部分丙型肝炎病毒抗体亲和力与印二A关系的生物信息学 机制探讨 ．．67 (一)前言(一)日U舌 6”／O (二)材料和方法 68 1．搜索NCBI等数据库 ．．68 2．采用Discovery Studio(DS)软件进行分子模拟 ．68 (三)结果 72 1．HCVNS3与6种}Ⅱ二A蛋白分子结构的构建 ．．72 2．HCVNS3与|玎二A蛋白分子结合模式的分析 75 (四)讨论 77 (五)结论 83 (六)参考文献 83 全文总结 一 ．．86 工作展望 ． 88 三、综述 ．． 89 (一)综述 ．89 万方数据 (二)参考文献 (二)参考文献 ．．99 四、附表 ．107 五、攻读学位期间发表文章情况 ．111 六、致谢 ．112 万方数据 人连医科大学博士学位论文基于抗体多维数据的解析探讨丙型肝炎病毒