MicroRNA-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响.PDF

天津医药2015年10月第43卷第10期 1137 MicroRNA-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响 △ 曹嫚，赵红 ，何军，戴利，殷小成，姚平波 摘要：目的 探讨小鼠肺成纤维化细胞模型中microRNA（miR）-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响。方法 24只SPF级C57BL/6小鼠随机分为假手术组和肺纤维化模型组，各 12只。经气管内注入博莱霉素建立小鼠肺纤维 化模型，采用荧光定量PCR检测各组肺组织miR-21的表达。提取小鼠成纤维细胞，胰酶消化，接种于6孔板，使细 胞浓度达到30%~50%。设随机对照组、空白对照组和miR-21mimic组。各组分别在50μLOpti-MEM加入2.5μL PBS、阴性对照储存液和miR-21mimic储存液（20μmol/L）。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性， 蛋白质印迹法检测成纤维细胞含 Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)和转化生长因子 （TGF）-β 的表达。结果 与假手术组比较，肺纤维化模型组小鼠肺组织中miR-21 的表达量明显上调。与随机对1 照组和空白对照组比较，miR-21mimic组成纤维细胞miR-21基因表达显著上调，成纤维细胞增殖率增加，ADAMTS-1 蛋白表达明显下降，而TGF-β 表达显著上调；空白对照组与随机对照组ADAMTS-1及TGF-β 蛋白表达无明显差 1 1 异。结论 在小鼠肺成纤维化细胞模型中上调的miR-21可通过ADAMTS-1/TGF-β信号通路促进肺纤维化。 1 关键词：肺纤维化；成纤维细胞；转化生长因子β1；微RNAs；细胞增殖；细胞分化；ADAMTS-1；microRNA-21 中图分类号：R563 文献标志码：A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.10.014 EffectofmicroRNA-21onproliferationanddifferentiationofpulmonaryfibroblastsofmice △ CAOMan，ZHAOHong ,HEJun,DAILi,YINXiaocheng,YAOPingbo PediatricsoftheAffiliatedNanhuaHositalofUniversityofSouthChina，Hengyang421001，China △CorrespondingAuthor E-mail：zhaohong779900@ Abstract：Objective ToinvestigatetheeffectofmicroRNA(miR)-21 onproliferationanddifferentiationofmurine pulmonaryfibroblasts. Methods C57BL/6miceofSPFgrade(n=24)wererandomlydividedintoShamgroupandPulmo⁃ naryfibrosismodelgroupwith 12miceineachgroup.Pulmonaryfibrosismodelwasestablished