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- 2019-07-13 发布于湖北
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基因表达载体的构建——核心 三、目的基因导入受体细胞 1、导入植物细胞常用的方法是什么?具 体过程是怎样的? 2、导入动物细胞常用的方法是什么?基本操作程序是怎样的? 3、导入大肠杆菌的方法是怎样的?钙离子有什么作用? 四、目的基因的检测与鉴定 导入目的基因后需要检测哪些方面?各采取什么方法? 什么是DNA分子探针?检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因和相应的mRNA? 利用抗体-抗原杂交检测的原理是什么? * 基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 (一)从基因文库中直接获取 1.基因文库:概念见P9 2.基因文库的分类:按外源DNA片段的来源分类 种类 基因组DNA文库:含有一种生物的全部基因 部分基因文库:只包含了一种生物的部分基因, 如:cDNA文库 3.基因文库的目的 为了在不知目的基因序列的情况下,便于获得所需的目的基因。 4.获取目的基因的根据: 见课本P9 (一)基因文库的构建 (1)基因组文库的构建 提取某生物 全部DNA 用适当 限制酶切割 许 多 DNA片段 与载体连接 导入受体菌群 该生物基 因组文库 (每个受体菌含有一段不同的DNA片段) (2)cDNA文库的构建——mRNA反转录形成 与载
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