线粒体dna突变与肿瘤发生的相关性.docVIP

线粒体DNA异常与肿瘤的相关性 龙 廷 综述 摘要：线粒体DNA（mtDNA）是真核细胞中唯一独立于核DNA之外的遗传物质，其特殊的环境、结构与功能以及在肿瘤细胞中所表现出的高比率异常，提示mtDNA与肿瘤发生之间存在密切的相关性。mtDNA异常与肿瘤之间的相互关系及其作用和调控机制仍是当前研究热点。 关键词：线粒体DNA，肿瘤 线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）是真核细胞中唯一存在的独立于核DNA之外的遗传物质，被称为“人类第25号染色体”。近年来在多种肿瘤组织中相继发现了线粒体DNA 异常，而且线粒体DNA 的突变率明显高于核基因，目前趋向认为肿瘤的生物学特征不仅取决于核内遗传物质，而且与核外线粒体DNA密切相关，线粒体DNA异常可能参与肿瘤发生。 1 线粒体DNA的结构与功能特点 Aderson等人于1981年首先完成对人类mtDNA全序列的测定[1]。mtDNA是一条全长16569bp的双链闭环分子，一条为重链（H链），含较多鸟嘌呤，是12S和16S rRNA基因、14种tRNA基因及12种蛋白多肽基因的模板，另一条为轻链（L链），含较多胞嘧啶，是8种tRNA基因和1种蛋白多肽基因的模板。mtDNA基因组内编码的13种蛋白多肽分布为：复合体Ⅰ（NADH-泛醌还原酶，NADH dehydogenase-uˉbiquinene oxidoreductase，ND）中7个亚基（ND 1 ，ND 2 ，ND 3 ，ND 4 ，ND 4L ，ND 5 ，ND 6 ）；复合体Ⅲ（泛醌-细胞色素C还原酶，ubiquinone-cytodhrome c oxidoreductase）中1个亚基（Cytb）；复合体Ⅳ（细胞色素C氧化酶，cytochrome c oxidase，CO）中3个亚基（COⅠ，COⅡ，COⅢ）和复合体V（ATP合酶，ATPsynthase）中2个亚基（ATPase6和ATPase8）。以上13种多肽均是呼吸链的组成成分。mtDNA相邻基因间极少有非编码基因，D环（D-Loop）区是mtDNA的主要非编码区，位于16028bp-577bp，约占全部mtDNA的6%（约1120bp），富含A-T碱基，包括3个高变区：16024-16324bp为高变区Ⅰ（HVⅠ），63-322bp为高变区Ⅱ（HVⅡ），438-574bp为高变区Ⅲ（HVⅢ）。D环区有mtDNA复制的起始位点和转录启动子，对mtDNA复制和转录具有调控作用。mtDNA可独立于核DNA之外自主地进行复制、转录和翻译，具有非常活跃的自我复制能力。mtDNA的基因结构全部是外显子，没有内含子，散发的DNA突变通常就可导致DNA序列的改变，造成蛋白质表达的变化。 2 导致线粒体DNA异常的主要因素 mtDNA结构简单，缺乏组蛋白和非组蛋白保护，环境特殊，处在活性氧及其他自由基包围之中；mtDNA分子量小，无内含子，在整个细胞周期中处于不断合成的状态，而负责mtDNA复制的DNA聚合酶γ校对能力差，而且mtDNA由D环区单链启动复制，容易在tRNA基因部位出现发夹样结构，mtDNA还缺乏有效的损伤修复系统，因此，mtDNA易受各类诱变因素作用而发生损伤和异常，其突变率比核DNA高10-20倍[2]。 2.1 ROS氧化损伤 在可能导致mtDNA突变的环境有害因子中，研究较多的是活性氧（reactive oxygen species，ROS）。mtDNA位于线粒体基质内，并靠近内膜电子传递链，直接暴露于线粒体内高氧环境，人体内90%以上的氧消耗直接与线粒体的呼吸链相联系，线粒体在呼吸链代谢中产生超氧粒子，在电子转运过程中生成的大量ROS以及过氧化物，线粒体本身不能合成谷胱甘肽将过氧化物有效清除，因此，当ROS产生过多或抗氧化防御系统作用减弱时，线粒体内氧自由基容易出现累积，可诱发mtDNA点突变，点突变可提高DNA双链的分离机会，促使mtDNA进一步发生核酸大片断丢失、断裂、碱基修饰和插入等不同形式的变异[3]。 2.2 致癌物结合 　mtDNA与富含脂质的线粒体内膜相连，线粒体内脂肪/ DNA 的比值较高，使mtDNA 对脂溶性化学物质非常敏感，并往往成为亲电子物质首选的靶点，具有嗜脂性的致癌物往往优先在mtDNA上聚集。在用亲脂肪硫氰酸MKT-077 体外处理肿瘤细胞与正常细胞的实验中, 结果表明在两种细胞中，MKT-077 与mtDNA 的结合量均显著高于与核DNA的结合量[4]。用同样的方法，以14C标记多种化学致癌剂体外处理培养细胞，一致表明致癌物与mtDNA的结合率相对核DNA高：烷化类致癌剂与mtDNA的结合率是核DNA的5倍；苯并芘与mtDNA的结合率为核DNA的40-90倍；多环香烃与mtDNA的结合率为核DNA的5