氧分压培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响.doc

PAGE 1190 中 国 农 业 科 学 41卷 4期 潘登科等：氧分压、培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响 PAGE 1191 中国农业科学 2008,41(4):1186-1191 Scientia Agricultura Sinica 收稿日期：2006-11-22；接受日期：2007-02-14 基金项目：国家“十五”科技攻关项目（2004BA717B） 作者简介：潘登科（1972-），男，吉林九台人，博士，研究方向为猪转基因克隆和干细胞。Tel：010Fax：010E-mail：pand@ 。通讯作者冯书堂（1945-），男，河北大名人，研究员，研究方向为小型猪培育和生物技术。E-mail：fst508@ 氧分压、培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎 体外发育的影响 潘登科，刘 吉，冯书堂，牟玉莲，张 莉 （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程室，北京 100094） 摘要：【目的】建立高效的猪体细胞克隆胚胎的体外培养体系。【方法】比较了克隆胚胎体外培养过程中高、低氧分压（20% O2和7% O2）和2种培养基（NCSU-23和 PZM-3）及添加表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维促进因子（bFGF）对胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响。【结果】（1）与高氧（20% O2）气相相比，低氧（7% O2）条件下NCSU-23显著提高了胚胎的囊胚率和细胞数（P＜0.05，13.7% vs. 8.2%；46.3 vs.31.0），培养基PZM-3只能显著提高囊胚细胞数（P＜0.05，49.4 vs. 36.6）；（2）与NCSU-23相比，PZM-3无论在高氧还是低氧条件，囊胚率和囊胚细胞数都较高；（3）NCSU-23中添加10 ng·ml－1 EGF或bFGF对胚胎的囊胚发育率（P＜0.05，25.5%，31.7% vs. 15.1%）有显著提高，但不能提高囊胚细胞数。【结论】低氧条件有利于胚胎的早期发育；PZM-3无论在高氧还是低氧条件下，都是胚胎发育的一个效果稳定、高效的培养基；胚胎培养基中添加EGF或bFGF能提高胚胎的囊胚发育率。 关键词：猪；体细胞核移植；氧分压；生长因子；培养基 Effect of Oxygen Tension, Culture Media and Growth Factors on in vitro Development of Porcine Somatic Cloned Embryos PAN Deng-ke, LIU Ji, FENG Shu-tang, MU Yu-lian, ZHANG Li (Department of Gene and Cell Engineering, Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100094) Abstract: 【Objective】This research focused on establishing a more efficient in vitro culture system for porcine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. 【Method】Systematical study had been carried on effect of oxygen tension（20% O2 and 7% O2）, culture media (NCSU-23 and PZM-3) and growth factors (EGF, bFGF) on in vitro development of porcine SCNT embryos, including blastocyst formation rate and cell number per blastocyst. 【Result】 In experiment 1, Compared with 20% O2, NCSU-23 in low oxygen (7% O2) greatly improved the blastocyst rate and cell number of cloned embryos（P＜0.05, 13.7% vs. 8.2%; 46.3 vs. 31.0）.Cloned embryos in PZM-3 and 7 % O2