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专题1 ? 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指通过 ,对生物的基因进行 ,然后导入 ,并使 在受体细胞中 ,产生人类所需的基因产物的技术。基因工程又被称为 。
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——
(1)来源:
主要是从 中分离纯化出来的。
(2)功能:
能够识别双链DNA分子的某种 的核苷酸序列,并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有 。
(3)结果:
经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式: 和 。
2.“分子缝合针”——
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:
①相同点:都缝 键。
②区别:
E·coliDNA连接酶来源于 ,只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合 ,但连接平末端的之间的效率 。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:
DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——
(1)载体具备的条件:
①
②
③
(2)最常用的载体是 ,它是一种
(3)其它载体:
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:
1.目的基因是指: 。
2方法1 ;2 ;3 .
原核基因最好采取 获得,真核基因最好利用 。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)原理:
(2)过程:
第一步:加热至90~95℃
第二步:冷却到55~60℃,
第三步:加热至70~75℃,
第二步:
1.目的:使目的基因在受体细胞中 。
2.组成:
(1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的 ,是 识别和结合的部位,能启动基因 ,最终获得所需的 。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 。使 终止。
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中
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