第十一讲蛋白质分离及纯化二.pptVIP

第十一讲 蛋白质的分离与纯化（二） 一、问答题（每题5分共30分）： 蛋白质工程的基本途径或主要步骤 什么是构型、构型，二者的主要差别。 Anfinsen原理及其意义。 紫外可见吸收光谱和荧光光谱。 什么是核磁共振（NMR）？实现核磁共振的两种方法是什么？ 什么是化学位移？1970年IUPAC规定，衡量化学位移的相对标准是什么？规定其化学位移常数是多少？表示化学位移物理量的符号和单位的符号各是什么？ 二、简述题（每题10分共40分） 蛋白质一级结构、二级结构、超二级结构、结构域和三级结构及其主要作用力？它们之间的相互关系怎样？ 如何理解蛋白质工程的含义（狭义和广义理解），其主线是什么？ 什么是基因突变技术，包括哪两大类技术？举例说明这两大类技术包括哪些方法。 预测蛋白质三级结构的方法有哪些？描述一种你熟悉的蛋白质高级结构预测方法的操作流程。 三、方案设计（10分） 某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，但对热稳定性较差，进入人体后容易失效，现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗消化不良，通过蛋白质工程手段能否提高蛋白质的稳定性，请您试设计两套改造方案，简述改造方案依据的原理。 提示和要求：一套方案采用分子生物学修饰，另一套采用化学修饰。 四、论述题（20分）： 论述蛋白质一级结构测定的基本程序以及主要方法和原理。 第四节 精制分离—液相色谱技术 概述 常