第七章蛋白质或多肽放射性标记及分析方法.pptVIP

第二部分 核素示踪技术在分子生物学研究中的应用 分子生物学是一门新兴边缘学科，它跨越了遗传学、细胞生物学、有机与无机化学、生物化学、物理学、生物物理学等许多学科，是当代数、理、化科学广泛深刻地渗入生物学而形成发展起来的。其中，核素示踪技术在其中起着里程碑性的重要作用。 一、35S和32P双标记噬菌体感染实验证明DNA是遗传信息的载体 1952年，Hershey和Chase用大肠杆菌的T2噬菌体繁殖实验，证实了从噬菌体颗粒注入到细菌中去的DNA含有繁殖后代噬菌体所需的全部信息。T2噬菌体颗粒由蛋白质外壳包裹的DNA(单链)核所组成。在DNA核与蛋白质外壳中，只有DNA含有磷原子，只有蛋白质中的甲硫氨酸和半胱氨酸含有硫原子，把T2噬菌体放在以放射性磷(32PO43－)为唯一磷源和以放射性硫(35SO42－)为唯一硫源的培养基中培养时，即可获得32P标记的DNA和35S标记的蛋白质的噬菌体。用这种双标记的噬菌体去感染大肠杆菌寄主，结果发现只有32P标记的DNA注入到寄主细胞内部并繁殖出具有蛋白外壳的子代噬菌体。在这些子代噬菌体中，有少量的DNA带有标记32P，但没有一个蛋白外壳带有标记35S。证实了DNA是遗传信息的携带者。 二、15N,14N标记E.Coli繁殖实验证明双链DNA具有半保留的复制机制 1957年，Meselson-Stahl用放射性标记技术，实验证明了Watson