轮纹病菌拮抗性大豆根瘤内生菌的筛选抗性和促-中国生物防治学报.pdf

32(3)396-405 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2016 年 6 月 轮纹病菌拮抗性大豆根瘤内生菌的筛选、抗性和促生作用 1* 1 2 赵龙飞 ，徐亚军 ，常佳丽 （1. 商丘师范学院生命科学学院/河南省高校植物与微生物互作重点实验室，商丘 476000 ；2. 清华大学环境学院水环境保护研究所，北京 100084 ） 摘要：从河南部分地区采集的大豆根瘤中分离 276 株内生细菌，采用平板对峙法进行初筛、复筛和内生菌 发酵滤液抑菌活性测定，对拮抗性代表菌株进行大豆轮纹病菌菌丝抑制效果显微观察、菌体生理生化特性 测试、16S rDNA 测序、系统发育分析及抗盐碱性试验和接种试验。结果表明，17 株初筛内生菌经复筛和 发酵滤液抑菌活性测定，其中 8 株抑菌率达 50% 以上；受作用菌丝发生扭结、缠绕成环状，菌丝末端分枝 增多、变细、透明，部分菌丝末端膨大、原生质浓缩、断裂，一些菌丝被内生菌形成生物薄膜包埋、逐渐 消融。8 株内生菌中 5 株（DD013 、DD123 、DD156 、DD159 、DD287 ）初步鉴定为芽孢杆菌属Bacillus ， DD150 为赖氨酸芽孢杆菌属 Lysinibacillu 、DD267 为肠杆菌属 Enterobacter ，菌株 DD303 为苍白杆菌属 Ochrobactrum。抗盐碱性生长曲线表明，菌株 DD287 对 3% NaCl 盐浓度具有一定抗性，在碱性环境 （pH 8 ） 下能正常生长，随 pH （9～11 ）增大，菌体生长量受影响。部分拮抗性菌株对大豆生长有促进作用。筛选 拮抗性菌株对丰富生物防治菌种资源具有重要意义。 关 键 词: 大豆轮纹病菌；根瘤内生菌；拮抗性；抗盐碱性；16S rDNA 序列 中图分类号：S476 文献标识码：A 文章编号：1005-9261 (2016)03-0396-10 Screening, Resistance and Growth Promoting of Antagonistic Endophytic Bacteria Isolated from Root Nodules of Soybean against Ascochyta glycines 1* 1 2 ZHAO Longfei , XU Yajun , CHANG Jiali (1. Henan Province Key Laboratory of Plant-Microbe Interactions/College of Life Sciences, Shangqiu Normal University, Shangqiu 476000, China; 2. Division of Water Environment, College of Environment, Tsinghua University, Beijing 100084, China) Abstract: Two hundred and seventy-six endophytic bacteria isolated from soybean root nodules of different areas in Henan province were screened by confrontation culture and fermentation filtrate culture methods for strains with strong inhibitory effect on Ascochyta glycines Miura, and morphological changes of phytopathogen hyphae was examined by microscopy. Their phylogenet