离体大鼠冠状动脉的分离培养及张力测定技术-中国药理学通报.pdf

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１４Ｍａｒ；３０（３）：４３３～７ ·４３３· 网络出版时间：２０１４－２－２４１３：４３　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１３４３．０３０．ｈｔｍｌ ◇实验方法学◇ 离体大鼠冠状动脉的分离培养及张力测定技术 邝素娟，邓春玉，杨　慧，饶　芳，刘晓颖，张梦珍，朱杰宁，单志新，林秋雄，杨　敏，余细勇 ［广东省人民医院（广东省医学科学院）医学研究中心，广东省心血管病研究所，广东广州　５１００８０］ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１４．０３．０３０ 本的功能，可用于各种因素对血管结构和功能影响的研究。 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１４）０３－０４３３－０５ 中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２１２１；Ｒ３２２７４；Ｒ３３１３２ 关键词：冠状动脉；培养；血管张力；大鼠；血管收缩剂；血管 摘要：目的　建立体外培养大鼠冠状动脉和测定血管平滑肌 舒张剂 舒缩功能的方法，为研究各种药物对血管张力的作用提供良 好的血管模型。方法　采用脱臼法处死 ＳＤ大鼠（２００～２５０ 　　器官培养是将部分或整体器官在不损伤正常组织结构 ｇ），取下心脏，冰浴条件下显微操作分离冠状动脉，制备成 的条件下进行体外培养的技术。它与整体实验相比，具有 １８～２０ｍｍ长的血管条，置于含ＤＭＥＭＦ１２培养基（内含 条件恒定、因素单一、便于干预的优点。与细胞培养相比，能 ５ －１ －１ １０％胎牛血清、１×１０Ｕ·Ｌ 青霉素、１００ｍｇ·Ｌ 链霉素） 更客观地反映细胞与细胞之间的相互联系，并避免细胞异质 的培养皿内，在３７℃，通以９５％Ｏ、５％ＣＯ 混合气的条件下 ［１］ ２ ２ 性和容易老化等缺点 。血管的器官培养因其组织结构和 培养２４ｈ后，用两根不锈钢丝穿过血管腔，固定于微血管张 功能系统的完整性，为研究药物或生理活性物质的长效作用 力测定仪的浴槽内。分别给予血管收缩剂５ＨＴ、Ｕ４６６１９、 ［２］ 提供了有效的方法 。目前血管培养应用比较多的是大血 ＣａＣｌ和血管舒张剂 ＡＣｈ，然后测定冠状动脉的张力变化。 管。微细动脉尤其是冠状动脉，因其血管壁平滑肌数量少、 ２ 结果　培养的冠状动脉对５ＨＴ、Ｕ４６６１９、ＣａＣｌ产生浓度依 血管壁薄、管腔小，操作难度大，目前国内甚少报道。但不同 ２ 赖性收缩，对ＡＣｈ产生浓度依赖性舒张反应。结论　采用离 部位的血管存在异质性，为建立微细动脉的培养模型，以便 体器官培养法培养离体的冠状动脉环，能保持血管平滑肌基 于对微血管的功能进行研究，本文采用大鼠冠状动脉血管环 进行培养，并利用工具药检测了其舒缩功能，发现本方法简 收稿日期：２０１３－１０－１８，修回日期：２０１３－１１－１９ 单可行，可用于进行微血管舒缩功能的研究，现将方法介绍 基金项 目：国家自然科学基金资助项 目（Ｎ８１０７０１０３， 如下。 ；广 东 省 自然科 学 基 金 重 点 项 目（Ｎｏ １　材料 Ｓ２０１２０２００１０９４７）；广东省 自然科学基金资助项 目（Ｎｏ