SN_T 0-7-6-4-1999 出口家禽新城疫病毒检验方法.pdfVIP

SN 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 sN/T 0764一1999 出口家禽新城疫病毒检验方法 Inspectionmethodonnewcastlediseasevirus inpoultryforexport 1999一05一05发布 1999一08一01实施 中华人民共和国国家出人境检验检疫局 批准 sv/T0764- 1999 前 言 本标准是根据GB/T1.1-1993标《准化工作导则 第1单元:标准起草与表述规则 第1部分:标 准编写的基本规定》的要求进行编写的。其中病毒分离鉴定、脑内接种致病指数(ICPI)、静脉内接种致病 指数((IVPD、鸡胚平均死亡时间(MDT)的测定方法等同采用国际兽医局 《动物疾病诊断方法和疫苗使 用标准手册》的方法，并根据实际，使之进一步具体化，同时制定了抽样和制样方法. 本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。 本标准由中华人民共和国山东进出口商品检验局负责起草。 本标准主要起草人:管恩平。 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 出口家禽新城疫病毒检验方法 SN/T0764一 1999 Inspectionmethodonnewcastlediseasevirus inpoultryforexport 范围 本标准规定了出口家禽样品的采集、新城疫病毒分离、毒力检验鉴定、检验方法和结果判定等. 本标准适用于出口家禽新城疫病毒的检验鉴定。 术语 新城疫是家禽的一种急性传染病。其病原新城疫病毒(NDV)是副粘病毒属的副粘病毒I型。该病 毒多呈圆形，直径100^-500nm,基因组为单股RNA，可凝集人、鸡、小鼠等多种动物的红血球((RBC), SPF鸡胚:将无特定病原((SPF)鸡所产的受精蛋孵化到试验要求的日龄。 判定所分离新城疫病毒毒力的指标为:对鸡胚平均致死时间(MDT)，对 1日龄小鸡的脑内接种致 病指数((ICPI)或者对6周龄小鸡的静脉接种致病指数((IVPI), 对强毒力的新城疫病毒,MDT-60h,ICPI-l.6,IVPI可达3.0. 对中等毒力的新城疫病毒,60hMDT90h,0.6ICPIl.5; 弱毒力的新城疫病毒,MDT90h,ICPI0.4,IVPI可为。。 HA与HI效价用2的指数次方表示，如27，即1:128,HA效价表示病毒的血凝活性，HI效价表示 抗血清的血凝抑制活性。 出口家禽中主要是肉鸡检测新城疫病毒，本方法描述时以鸡为主要对象，其他家禽NDV检测方法 同本法。 3 器材与试剂 3 1 器材 3 . 1 仪器:分析夭平、普通离心机、微型振荡器、煮沸消毒器、冰箱、高压消毒器、微量移液器、滴头、血 凝反应板、孵化箱、出雏箱、培养皿、牙签、医用脱脂棉、有盖玻瓶、注射器((1mL)、注射针头(V号)、干烤 箱。 3.1.2 试剂:磷酸二氢钠(AR),磷酸氢二钠(AR),氯化钠(AR)、青霉素、链霉素、卡那霉素、制霉菌素、 营养琼脂(AR),葡萄搪(AR)、柠檬酸钠(21-120)(AR),蒸馏水。 3.1.3 SPF鸡胚(9-11日龄),1日龄SPF鸡.6周龄SPF鸡(购自国家认可的SPF鸡场)。 3.2 试剂配制 3.2.1 棉拭子准备:将脱脂棉缠于牙签的钝端，使其形成直径0.4cm的脱脂棉球。然后用牛皮纸包扎， 每捆 10只，121℃高压 15min，备用。 3.2-2 pH7.2磷酸缓冲液(PB):由0.15mol/L的A,B两液组成. A液:磷酸氢二钠(Na,HPO,·12H}O)3.93g加蒸馏水至73mL, 中华人民共和国国家出人境检验检疫局1999一05一05批准