第六章分子生物学及基因工程酶学基础.pptVIP

第六章 分子生物学与基因工程的酶学基础 第一节 限制性内切酶 6.1.4 限制性内切酶的命名方式 6.1.5 同尾酶和同裂酶 6.1.6 Ⅱ型酶的特点和识别位点 6.1.7 类型II限制性内切酶的主要用途 2，产生克隆位点 6.1.8 影响核醚内切限制酶活性的因素 6.1.8 影响核醚内切限制酶活性的因素 6.1.8 影响核醚内切限制酶活性的因素 6.1.8 影响核醚内切限制酶活性的因素 6.1.8 影响核醚内切限制酶活性的因素 6.1.9限制性内切酶对DNA的消化 6.2.1 连接酶 6.2.2 常见的DNA连接酶 6.2.3 连接酶的连接作用 6.2.4 DNA的连接策略 第三节 DNA聚合酶 6.3.5 Taq DNA聚合酶 (一)酶活性与热稳定性 (二)离子依赖性 (三)忠实性 (四)抑制剂 6.３.６　T7 DNA聚合酶 T7 DNA聚合酶有如下几个方面的用途： 修饰的 T7 DNA聚合酶 6.３.７　末端转移酶 返回第三章 （1）必须是两条双链DNA。 （2）DNA3’端有游离的-OH，5’端有一个磷酸基团（P）。 （3）需要能量 动物或噬菌体中：ATP 大肠杆菌中： NAD+ 连接条件 二、平末端DNA片段的连接 一、粘性末端DNA片段的连接 (1)同聚物加尾法 (2)衔接物连接法 双衔接物法 (3)DNA接头连接法