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第二章 克隆技术  个体通过无性繁殖可连续传代并形成群体，这样的群体称为无性繁殖系。 克隆是英文“ clone ”的音译，就是指无性繁殖系。 植物组织培养 原理： 植物细胞全能性 * * * * （一）无性繁殖 种类：1.草履虫、变形虫的分裂生殖 2.根 霉、青 霉的孢子生殖 3.水 螅、酵母菌的出芽生殖 4.草 莓、马铃薯的营养生殖:嫁接、扦插 不经过异性生殖细胞的结合,直接由母体产生下一代的繁殖方式叫无性繁殖。 特点：①子代个体保持了亲本的一切性状 ②一次产生的后代数量大，可以迅速扩大种群数量 ③变异类型少，不利于种群的进化 母 体 无性生殖细胞 或幼体 成体 有丝分裂 知识回忆 繁殖的类型: 细菌通过分裂生殖20分钟繁殖一代 分裂生殖 海葵 水螅 芽体 母体 植物枝条扦插繁殖 富贵竹插枝即活 仙人掌每块落地就生根 （二）有性生殖： 双 亲 两性生 殖细胞 合 子 新 个 体 特点：①子代具有双亲的遗传特性 ②繁殖的速度比较慢 ③产生更多的变异性，有利于种群的进化 经异性生殖细胞的结合，产生合子，由合子发育 成下一代的繁殖方式叫有性繁殖。 减数分裂 知识回忆 第一节 什么是克隆 克隆羊“多利” 一、无性繁殖与克隆 只要不通过两个分子、两个细胞或两个个体的结合，只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代分子、细胞或个体，就是无性繁殖，即克隆。 分子水平——基因克隆 细胞水平——细胞克隆 个体水平——个体克隆 克隆的层次： 目的基因在受体细胞内克隆 导入 复制，繁殖 DNA复制 1、分子水平 重组质粒 受体细胞 基因克隆是指某种目的基因的复制、分离过程。 注射抗原 效应B细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 2、细胞水平 细胞克隆技术在利用杂交瘤制备单克隆抗体的操作中得到充分运用。 2.制备过程： 细胞水平的克隆实例 基因克隆和细胞克隆是现代生物技术中的关键技术，在基础科研、遗传育种和肿瘤生物治疗等方面广泛应用。 克隆就是指一种通过单个细胞，特别是来自特定个体 的单个细胞进行无性繁殖，从而产生新个体的过程。 如：植物组织培养技术、 克隆羊“多莉”的产生 3、个体水平 一、克隆的层次： 1、在分子水平上 2、在细胞水平上 3、在个体水平上 重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增，再用某探针选取、钓取目的基因。 单克隆抗体：利用动物细胞融合技术将骨髓瘤细胞和能产生抗体的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，再去培养，筛选到杂交瘤细胞系。 不通过两性细胞的结合，从一个单一的细胞繁殖出生物个体。即细胞 个体 参见P6页图1-4 ——基因克隆 ——细胞系的培养（制备单克隆抗体） ——繁殖出生物个体 组织培养的过程 （无菌）切下根尖 无菌培养 形成愈伤组织 组织分化形成器官 发育成新个体 你知道 克隆羊Dolly(多莉) 的诞生 过程吗？ 多利的一生 姓名：多利 性别：雌 种族：哺乳纲、羊科、绵羊 生日：1996年7月5日 出生地：苏格兰 基因父亲：无 基因母亲：一只芬兰白绵羊 线粒体母亲：一只苏格兰黑脸羊 生育母亲：另一只苏格兰黑脸羊 进入社交圈时间：1997年2月23日 子女：生育6名，存活5名 死亡：2003年2月14日 卵细胞 苏格兰黑面 母羊（B） 芬兰白面 母羊（A） 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 多莉羊的培育过程： 胚胎细胞克隆 体细胞克隆 重组细胞 早期胚胎 另一头苏格兰黑面 母羊C子宫 妊 娠 、出生 克隆绵羊“多莉” 电脉冲刺激 芬兰白面 母羊（A） 乳腺细胞核 苏格兰黑面 母羊（B） 去核卵细胞 细胞核移植 胚胎移植 二、克隆技术的发展： 微生物克隆时期 遗传工程克隆时期 个体水平上的克隆时期 ——DNA克隆或基因克隆 ——植物克隆、动物克隆 ———————细菌的繁殖等