再次离心样品解冻后测定前。据建议,所有样品和标准来测.docVIP

有机化学试剂：在使用前，将所有试剂和样品室温。再次离心样品解冻后测定前。据建议，所有样品和标准来测定一式两份。1。准备好所有试剂，工作标准和样品在前面的章节中。2。请确定井数的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥剂，密封保鲜袋，将未使用的井在4°C的含量布局表。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时，在37℃下 一盘布局记录标准和样品检测。4。每孔中取出的液体，不洗。5。向每孔中加入100μl生物素抗体（1倍）。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时，在37℃下 （生物素抗体（1X）可能会出现混浊。预热至室温，轻轻混匀，直到出现均匀解决方案。）6。吸液的各孔和洗涤，共洗涤三次重复该过程两次。洗净，每孔填充洗涤缓冲液（200μL）使用喷瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，静置2分钟，彻底清除液体的每一步是必不可少的良好的性能。最后一次洗涤后，清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一个新的粘接剂条。温育1小时，在37℃下8。重复的愿望/洗涤过 ??程中，在步骤6的5倍。9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟，在37℃下 避光10。一站式解决方案，每孔加入底物，轻轻晃动酶标板，以确保充分混合。11。在5分钟内，设置至450nm，使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正，设置为540 nm或570 nm处。在540 nm或570 nm波长在450 nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450 nm处未经修正读数直接，可能会比较高，不太准确。 批内精密度（内检测精度）：CV％8％三种已知浓度的样品进行了测试20次在一个平板上进行评估。间精密度（精密检测间）：CV％10％已知的三个样本20检测到的浓度进行了测试评估。样品采集和存储： 血清：使用血清分离管（SST）和全血标本在室温下两小时或4℃过夜℃，然后离心15分钟，在1000×g下。删除上清即可检测，或分装和店内样品在-20°C或-80°C。但应避免反复冻融循环。等离子：采集血浆中EDTA或肝素作为抗凝血剂。在2-8°C在30分钟内收集离心15分钟，1000×G。即可检测，或分装保存样本在-20°C或-80°C。但应避免反复冻融循环。