专题2 微生物的培养和应用.pptVIP

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(4)纯化培养中接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法,前一种方 法形成的菌落分布较均匀,后一种方法形成的菌落分布不均匀,先划 线的部分菌落密集甚至相连,后划线的部分菌落分布稀疏。 (5)探究温度对酶活性的影响时,温度为自变量,酶活性为因变量,其他 凡能影响酶活性的变量如底物和酶的用量、pH、反应时间等均为无 关变量。 答案:(1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温 (3)高压蒸汽灭菌 无菌 (4)稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数 (或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作;或用接种环划下一区域前 接种环没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理) (原因与操作要对应) (5)温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH 2.现在大力提倡无纸化办公,但是每年仍然不可避免要产生大量的废 纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的资源— —乙醇。下图是工业上由微生物利用纤维素生产乙醇的基本工艺流 程,请回答相关问题。 ? (1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在   ????的环境中。将 从土壤中获得的微生物培养在以   ????为碳源、并加入   ???? 的培养基上筛选周围有   ????的菌落。 (2)如上所述的筛选中获得了三个菌落,对它们分别培养,并完成环节 ②,且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同,则你认为三种酶液的活性????   ????(填“一定相同”“不一定相同”或“一定不相同”),可以通 过???? 进行定量测定。 (3)根据测定结果,①环节常选择木霉,则②中获得的酶是   ????酶 。该酶至少包括      ????三个组分。 (4)生产中可以满足④环节的常见菌种是   ????,为了确保获得产 物乙醇,⑤环节要注意       ????,④过程要注意避免????。 (5)该技术虽然有广阔的前景,但存在酶的成本高等问题,为了降低成 本主要从以下几方面入手改进该过程。首先要通过   ????等技术 手段对产酶微生物改造,提高酶的产量。其次,可利用   ????等技 术使酶能够重复利用。 解析:(1)题图①中培养产纤维素的酶,需要的微生物大多分布在富含 纤维素的环境中。在刚果红指示剂的培养基中筛选周围有透明圈的 菌落,即可获得要分离的微生物。 (2)酶的活性受多种因素的影响,等量的酶液中,即使酶蛋白浓度相同, 酶的活性不一定相同,可以用纤维素酶分解纤维素后产生的葡萄糖进 行定量分析。 (3)木霉中获得的酶主要是纤维素酶,纤维素酶至少包括C1酶、Cx酶和 葡萄糖苷酶。 (4)发酵生产乙醇离不开酵母菌,同时要提供无氧环境,保证酵母菌的 无氧呼吸。 (5)通过基因突变或基因工程等技术手段改造产酶微生物,提高酶的 产量;同时可利用固定化酶等技术使酶重复利用。 答案:(1)富含纤维素(其他答案合理也可,如落叶较多等) 纤维素 刚果红 透明圈 (2)不一定相同 对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖 (3)纤维素 C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶 (4)酵母菌 发酵装置密闭(或保证无氧条件等) 杂菌污染 (5)基因工程(基因突变) 固定化酶 3.(密码改编)氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污 染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯 的微生物SP1菌,培养基配方如下表。 图1 表 培养基的组成 液体 培养基 蛋白胨 牛肉 膏 氯苯 氯化钠 硝酸铵 无机盐 (无碳) 蒸馏水 Ⅰ号 10 g 5 g 5 mg 5 g — — 1 L Ⅱ号 — — 50 mg 5 g 3 g 适量 1 L Ⅲ号 — — 20~ 80 mg 5 g 3 g 适量 1 L (1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1 %的   ????。 (2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是   ????。 (3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于   ????培养 基和   ????培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是    ????。 (4)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲 线(如图2)。从图2可知,SP1菌在   ????培养条件下最早停止生长, 其原因是????。 专题2 微生物的培养和应用 ? 一、微生物的实验室培养 1.培养基 (1)种类:按培养基的物理性质分为: ①液体培养基:配制成的液体状态的基质,一般用于生产。 ②固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(如琼脂),配制成的固体状 态的基质,琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。 (2)培养基配方及营养要素 基本营养要素:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此 外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 固体培养基适合于分离、

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