分离植物甘油酯的薄层层析色谱法的优化-江苏农业科学.pdf

江苏农业科学　２０１８年第４６卷第２４期 — ２３５— 陈亚东，薛金?，徐　婷，等．分离植物甘油酯的薄层层析色谱法的优化［Ｊ］．江苏农业科学，２０１８，４６（２４）：２３５－２３８． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１８．２４．０６５ 分离植物甘油酯的薄层层析色谱法的优化 １ １ １ ２ ３ １ 陈亚东 ，薛金? ，徐　婷 ，刘　华 ，雷　洁 ，甘　毅 （１．浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江临安３１１３００；２．浙江农林大学林业与生物技术学院，浙江临安３１１３００； ３．南京农业大学农学院，江苏南京２１００９５） 　　摘要：甘油酯是植物体内重要的初生代谢产物，参与到细胞膜脂的形成，薄层层析色谱法是研究植物脂类代谢中 分离甘油酯的常见方法。为了获得良好的脂类成分分离效果，相关文献多采用三氯甲烷 ∶甲醇 ∶水（６５∶２５∶４）的溶 剂配比来作为双向ＴＬＣ第一向的展开相。但在一些甘油酯含量较少的样本中，上述溶剂相无法获得良好的分离效 果。本研究对上述溶剂系统进行优化，分别采用三氯甲烷 ∶甲醇 ∶氨水（６５∶３５∶５）和三氯甲烷 ∶丙酮 ∶甲醇 ∶乙 酸 ∶水（５０∶２０∶１０∶１０∶５）作为展开相。结果表明，改进后的溶剂系统能够高效地分离植物组织样本中的糖脂和磷 脂，在硅胶板上形成清晰的、不连续的脂类斑块。上述方法对有效分离植物样本中的脂类组分具有一定的实用价值。 　　关键词：薄层色谱分析；甘油酯；糖脂；磷脂；分离 ＋ 　　中图分类号：Ｏ６５７．７１；Ｏ６５８．１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１８）２４－０２３５－０４ ［９］ 　　脂类（ｌｉｐｉｄｓ）是生物细胞膜的主要组成成分，在植物光合 离植物三酰基甘油（ＴＡＧ）和极性脂 。也有一些研究采用 作用、细胞信号传导、逆境胁迫等生命活动中扮演着极其重要 丙酮 ∶甲苯 ∶水（体积比９１∶３０∶８）作为展开相，分离植物 ［１－５］ ［１０］ 的角色 。从极性上分，脂类可分为极性脂和中性脂，前者 样本中的糖脂和磷脂 。由于单向ＴＬＣ不能很好地分离出 包括单半乳糖二酰甘油（ｍｏｎｏｇａｌａｃｔｏｓｙｌｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，简称 ＰＣ、ＰＥ、ＰＩ、ＰＳ等磷脂组分，所以双向ＴＬＣ应运而生。双向 ＭＧＤＧ）、双半乳糖二酰甘油（ｄｉｇａｌａｃｔｏｓｙｌｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，简称 ＴＬＣ是将点样后的硅胶板先进行一个方向的层析展开，然后 ＤＧＤＧ）、硫脂 －硫代异鼠李糖二酰甘油（ｓｕｌｆｏｑｕｉｎｏｖｏｓｙｌ 将层析板顺时针旋转９０°，进行第２个方向的层析。结束后 ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，简称 ＳＱＤＧ）、磷脂 酰甘油 （ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ 显色刮板，刮取不同的脂质组分斑块，进行后续的分析。在相 ｇｌｙｃｅｒｏｌ，简称 ＰＧ）、磷脂酰胆碱（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，简称 关文献中，双向ＴＬＣ常采取三氯甲烷 ∶甲醇 ∶水（体积比 ＰＣ）、磷脂酰乙醇胺（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ，简称 ＰＥ）、磷 ６５∶２５∶４）进行第一相展开，然后再使用三氯甲烷 ∶丙 脂酰肌醇（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ，简称ＰＩ）、磷脂酸（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ 酮 ∶甲醇 ∶乙酸 ∶水（体积比５０∶２０∶１０∶１０∶５）进行第二 ［１１］ ａｃｉｄ，简称ＰＡ）等，后者包括三酰基甘油（ｔｒｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，简称 相分离展开 。上述溶剂系统在脂类研究中非常常见，适用 ＴＡＧ）、二酰基甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，简称ＤＡＧ）等。